[发明专利]一种以秸秆为原料制备可发酵糖液的方法

摘要

本发明公开了一种以秸秆为原料制备可发酵糖液的方法，该方法采用木质纤维素混合菌对秸秆和麸皮的混合物进行发酵；将抽提获得的粗酶溶液直接用于预处理秸秆的水解，无需进行酶分离和浓缩，最后获得的可发酵糖液是纤维素酶和混合糖的混合物；其中预处理秸秆的制备原料为抽提后的固体残值，提高原料利用率；该方法获得的糖液适用于同时有木糖和葡萄糖发酵能力菌株的发酵；本方法作为一个连续的过程，其酶系具有较高的水解效率，同时可以降低过程成本，提高原料利用率。

主权项

一种以秸秆为原料制备可发酵糖液的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）固态浅层发酵用于木质纤维素酶的生产：将秸秆和麸皮加入Mandel培养液中，灭菌，配制固态发酵培养基，其中，秸秆和麸皮质量比为3：1，秸秆和麸皮的总量与Mandel培养液的质量体积比为1：1；然后在固态发酵培养基中接入木质纤维素酶生产复合真菌的孢子悬液，使用的木质纤维素酶生产复合真菌可以是木霉、米曲霉和黄孢原毛平革菌的组合，木霉、米曲霉和黄孢原毛平革菌的孢子浓度（个/ml）优选配比为94：6.7：1.3；复合真菌在28度进行封闭式静止发酵，培养4天后获得发酵物；（2）粗酶溶液的制备：按柠檬酸缓冲液与步骤（1）获得的发酵物的体积质量比为20：1，在发酵物中加入柠檬酸缓冲液，得第一混合物；柠檬酸缓冲液的浓度为0.05M，pH为4.8，第一混合物在37度下进行抽提，抽提过程中不停搅拌或者摇晃；固液分离后，液体即为粗酶溶液；（3）秸秆水解糖液制备：收集发酵抽提物固液分离后剩下的残渣；加入V/V比为2.5%、pH为11.5的过氧化氢水溶液，得第二混合物，残渣与过氧化氢水溶液的质量体积比为10：100；第二混合物在37度，180rpm处理24h后，清水洗至pH为中性；烘干，获得预处理秸秆；将步骤（2）获得的粗酶溶液加入预处理秸秆，在50度下酶解反应20 72h；固液分离后，液体即为可发酵糖液；直接用于发酵，或者浓缩后储存。