[发明专利]一种纯化病毒样颗粒蛋白的方法及其应用无效
申请号: | 201110171728.7 | 申请日: | 2011-06-24 |
公开(公告)号: | CN102260651A | 公开(公告)日: | 2011-11-30 |
发明(设计)人: | 邱志华;杨仕俊;廖玉华;周子华;陈霄;陈芬;王敏 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N7/02;C12R1/92 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 王和平 |
地址: | 430022 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种纯化病毒样颗粒蛋白的方法及其应用。这种高效的纯化病毒样颗粒蛋白的方法建立在一个低pH缓冲体系上,将含有病毒样颗粒的样品置于低pH缓冲体系中,这种强酸性缓冲环境能够使绝大部分杂蛋白变性和碎片化,经一步酸化后,蛋白就可以达到80%左右的纯度。通过简单离心和进一步的分离层析将变性蛋白和片段去除,获得纯化后的病毒样颗粒蛋白。公开了这种方法在纯化Qβ噬菌体病毒样颗粒蛋白、Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白和HK-97噬菌体病毒样颗粒蛋白的应用。这种纯化方法简单、成本低廉且有很高的纯化效率,有很大的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 病毒 颗粒 蛋白 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种纯化病毒样颗粒蛋白的方法,其特征在于它包括以下步骤:1)配制pH值在2.4 4.0的低pH缓冲体系;2)将含有病毒样颗粒的样品直接置于步骤1)中的低pH缓冲体系中或通过透析袋间接置于低pH缓冲体系中,4℃透析,隔6小时换液一次,共2次;3)10,000rpm离心10分钟,弃去沉淀,重复离心一次,上清以pH7.4的PBS稀释,获得酸化后的样品。
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