[发明专利]一种新型荧光实时定量检测miRNA的方法无效
申请号: | 201110174524.9 | 申请日: | 2011-06-27 |
公开(公告)号: | CN102851352A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 李烔;吕卓璇;段德民;曹榕;姜丽;沈叶;惠利省;顾唯兵;郑克孝;赵转 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人: | 高宇;杨小蓉 |
地址: | 215123 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及分子检测领域,具体地,本发明涉及一种新型荧光实时定量检测miRNA的方法。根据本发明的新型荧光实时定量检测miRNA的方法包括,所述方法利用miRNA、通用引物和特异性引物进行荧光定量PCR扩增1)设计靶标miRNA的特异性引物,包括直链和茎环引物,以及通用引物;2)以miRNA提供碱基堆积力,帮助特异性引物和通用引物结合,利用DNA聚合酶延伸特异性引物;3)以上述延伸的DNA链为模板继续延伸通用引物;4)根据荧光定量PCR结果判断检测样品中是否含有靶标miRNA。本发明的方法在整个操作过程中既无需反转录过程,也无需荧光标记探针,且操作简单,因此可以大大提高检测效率、缩短检测周期、降低检测成本,适用于早期诊断和临床检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 新型 荧光 实时 定量 检测 mirna 方法 | ||
【主权项】:
一种新型检测miRNA荧光定量PCR方法,其特征在于,利用miRNA、通用引物和特异性引物进行荧光定量PCR扩增,其中,1)设计靶标miRNA的通用引物和特异性引物,其中特异性引物包括直链和茎环引物;2)以miRNA提供碱基堆积力,帮助特异性引物和通用引物结合,利用DNA聚合酶延伸特异性引物;3)以上述延伸的DNA链为模板继续延伸通用引物;4)根据荧光定量PCR结果判断检测样品中是否含有靶标miRNA。
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