[发明专利]一种β-环糊精配基琼脂糖氢键吸附纯化缩宫素的方法

摘要

本发明涉及一种使用氢键吸附色谱分离纯化化学合成缩宫素的方法。此方法采用表面键合了β-环糊精配基的高浓度、高交联度的琼脂糖凝胶介质，根据氢键吸附原理，从化学合成(包括液相合成和固相合成)的缩宫素粗品中，分离纯化缩宫素，用于缩宫素原料药的生产，具有选择性高、样品载量高、介质重复利用度高等优点，克服传统反相色谱法的介质重复利用度低、样品载量低的缺点。

主权项

一种采用以β‑环糊精为配基的琼脂糖凝胶氢键吸附色谱介质分离纯化化学合成缩宫素的方法。分离纯化方法具体如下：1)流动相组成：乙腈‑乙酸‑水体系，初始流动相为20‑30％乙腈，配制好的流动相用0.45μm滤膜过滤，超声脱气或真空脱气10‑30min，室温静置0.5‑1h备用；2)化学合成缩宫素粗品溶解于初始流动相，配制成10～50mg/mL溶液，超声助溶1～5min，0.45μm滤膜过滤；3)β‑环糊精配基琼脂糖凝胶氢键吸附色谱介质装柱，用初始流动相平衡2个柱床体积后进样，样品体积为柱床体积的5～50％；4)洗脱方式：初始流动相等度洗脱2个柱床体积后，纯水等度洗脱2个柱床体积，然后采用0～10％乙酸线性梯度洗脱，梯度长度为5～10个柱床体积，线性流速20～100cm/h；5)紫外检测器280nm在线监测，自动收集馏分；6)将步骤5)收集的馏分冷冻干燥，用15％乙腈(含0.1％三氟乙酸)溶解配制成0.2mg/mL溶液，进行纯度检测：采用反相高效液相色谱C18柱，采用乙腈‑三氟乙酸‑水为流动相体系，线性梯度洗脱，15％乙腈(含0.1％三氟乙酸)为梯度起点，90％乙腈(含0.1％三氟乙酸)为梯度终点，梯度长度30min，紫外检测器210nm在线监测，计算缩宫素纯度和收率。