[发明专利]癌基因BRAFV600E突变检测的引物和探针

摘要

本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种检测癌基因BRAFV600E突变的多条引物和探针。本发明的引物和探针分别包括突变特异性上游引物、突变非特异性上游引物和通用下游引物以及通用探针，如SEQ NO.1～11所示。本发明提供的突变特异性引物和探针的检测灵敏度可以达到500拷贝/ml，灵敏度良好；不含BRAFV600E的样本时，其扩增曲线ct值≥36，特异性强；由于本发明同时设计突变非特异性引物用于检测样本的总模板量，避免假阴性结果，方便质控。

主权项

用于检测癌基因BRAFV600E突变的引物，包括通用下游引物BRAFR和只扩增突变型模板的突变特异性上游引物BRAFFE；其特征在于，所述的突变特异性上游引物BRAFFE是下述序列中的任意一条：SEQ NO.1：5′‑GTGATTTTGGTCTAGCTACTGA‑3′；SEQ NO.2：5′‑GTGATTTTGGTCTAGCTACTTA‑3′；SEQ NO.3：5′‑AAAAATAGGTGATTTTGGTCTAGCTACATA‑3′；SEQ NO.4：5′‑GGTGATTTTGGTCTAGCTACAAA‑3′；SEQ NO.5：5′‑ATAGGTGATTTTGGTCTAGCTACTTA‑3′；所述通用下游引物BRAFR是下述序列中的任意一条：SEQ NO.6：5′‑GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA‑3′；SEQ NO.7：5′‑TAGTTGAGACCTTCAATGACTTTCTAGTAA‑3′。