[发明专利]一种测定活的血管内皮细胞表面摩擦性能的方法

摘要

一种测定活的血管内皮细胞表面摩擦性能的方法，以具有与生理血管类似结构和功能的高分子水凝胶加上单层血管内皮细胞膜构筑软材料活细胞人工血管模型，用于体外直接、定量且能长时间准确测定在体外培养的或者活的人体血管内皮细胞表面摩擦性能的方法，加强了细胞在水凝胶支架表面的粘附力，从而在测试中细胞不易被从水凝胶表面剥离，便于活细胞摩擦长时间准确检测；而该方法中使用到的高分子水凝胶，将处于“柔软的”水凝胶细胞培养支架与“柔软的”水凝胶摩擦基板之间的“夹心”状态，粘弹性的高分子水凝胶将有效减小细胞所承受的应力，从而保护细胞生存状态，克服细胞易于被剥离损坏的缺点，具有准确评价活细胞摩擦性能的优点。

主权项

一种测定活的血管内皮细胞表面摩擦性能的方法，其特征在于，步骤如下：步骤1：首先将高分子水凝胶按照预设的支架构架和基板构架分别切割加工成高分子水凝胶支架和高分子水凝胶摩擦基板，将该高分子水凝胶支架和高分子水凝胶摩擦基板进行高温灭菌15‑20分钟；步骤2：随后将人体脐带静脉血管内皮细胞直接播种于高温灭菌后的高分子水凝胶支架的一侧表面后，在内部温度为37℃且内部CO2的体积百分比为5％的培养箱中培养，直到血管内皮细胞扩增为单层血管内皮细胞膜，这样带有扩增为单层细胞膜的高分子水凝胶支架就构筑成软材料活细胞人工血管模型；步骤3：将待与单层血管内皮细胞膜摩擦的高分子水凝胶基板粘接在流变仪溶液池的底面，并在流变仪溶液池内加入对应的细胞培养液，随后将高分子水凝胶支架的带有单层血管内皮细胞膜的一侧表面朝向高分子水凝胶基板，而将高分子水凝胶支架的另一侧表面粘接于流变仪上部的几何测头上，启动流变仪的升降系统控制几何测头下降，直至软材料活细胞人工血管模型的单层血管内皮细胞膜与高分子水凝胶基板相接触且相接触时垂直压力P达到预定值范围1～50Pa时，保持平衡10分钟，随后启动流变仪，按照预设的扭矩T(ω)使高分子水凝胶基板沿旋转中心旋转至预定的最大角速度ω，当达到最大角速度ω时，待测点的摩擦力F(ωR)与扭矩T(ω)的关系为F(ωR)＝[4T(ω)]/3πR3，其中R为待测点和旋转中心之间的距离，根据摩擦力F(ωR)与所施加的垂直压力P的除值导出被测点的摩擦系数μ。