[发明专利]花生壳高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明涉及花生壳高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。首先，取花生壳粉末，加入甲醇超声提取，并将上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；然后进行高效液相色谱分析，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；采用梯度洗脱，流动相为0.2%的乙酸水溶液-甲醇；检测波长294±2nm；柱温35℃，精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。通过对26个品种花生壳的HPLC指纹图谱比对，确定其共有指纹特征，得到标准指纹图谱，本发明花生壳提取物的指纹图谱测定方法简便，易于掌握，可用于花生壳提取物的质量控制，确保花生壳提取物相关产品的有效性、安全性、稳定性和均一性。

主权项

一种花生壳高效液相色谱指纹图谱建立方法，包括下述的步骤：a 待测样品溶液的制备：将花生壳去杂、清洗、干燥后粉碎并过40～80目筛，称取过筛后的花生壳粉末8～12g，置于具塞容器中，加入250～350mL甲醇，超声提取30～50min，以3000～4000r/min的转速离心5～15min，上清液用0.22μm或 0.45μm的微孔滤膜过滤，得到的滤液即样品溶液;b 液相色谱分析：高效液相色谱采用的色谱柱为ZORBAX SB C18，4.6×250mm，5μm；流动相为0.2%乙酸水溶液 甲醇；采用梯度洗脱方式0min → 3min → 5min →30min → 60min →75min，甲醇5% →5% → 30%→ 50% 80% →80%；流速1.0mL/min；检测波长294±2nm；柱温35℃，在此条件下分析样品溶液，得到花生壳的液相指纹图谱；c 标准指纹图谱的确定：测定了26个品种花生壳样品高效液相色谱指纹图谱并进行比较，得到由其共有峰构成的花生壳高效液相色谱标准指纹图谱，该指纹图谱具有的共有特征峰有12个，保留时间分别为：10.513min、12.260min、12.943min、14.363min、19.664min、26.622min、34.712min、37.487min、48.363min、49.475min、50.440min、59.196min，这些共有特征峰构成了花生壳的液相指纹特征，是花生壳的标准指纹图谱。