[发明专利]一种黄牛TMEM18基因的单核苷酸多态性检测方法

摘要

本发明公开了一种检测黄牛TMEM18(transmembrane protein 18)基因单核苷酸多态性的方法，其基因多态性包括：在黄牛TMEM18基因第3843位为A或G的碱基多态性；在黄牛TMEM18基因第3873位为G或A的碱基多态性。上述黄牛TMEM18基因的单核苷酸多态性为：以包含TMEM18基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对1F和2F为引物，PCR扩增黄牛TMEM18基因；分别用限制性内切酶XspI和MluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛TMEM18基因第3843位和第3873位的单核苷酸多态性；该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记，以便于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS)，快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

主权项

一种黄牛TMEM18基因的单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：以包含黄牛TMEM18基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对1F为引物，PCR扩增黄牛TMEM18基因，所述的引物对1F为，正向上游引物：5’‑GGCATGTTCATCTCCCTTGT‑3’，反向下游引物：5’‑GCCCTGCACTGCTGTTTGTCC‑3’，用XspI限制性内切酶消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛的TMEM18基因第3843位的单核苷酸多态性；以包含黄牛TMEM18基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对2F为引物，PCR扩增黄牛TMEM18基因，所述的引物对2F为：正向上游引物：5’‑AGCAGCCTGCTGTCCATACACGC‑3’，反向下游引物：5’‑GGGAGGGCCCTGCACTGCTGTTAG‑3’，用MluI限制性内切酶消化PCR扩增产物，再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛的TMEM18基因第3873位的碱基多态性。