[发明专利]重组羧肽酶B的制备方法无效
| 申请号： | 201110213185.0 | 申请日： | 2011-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN102286502A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 彭毅;张琪;张婷婷;王大梅 | 申请（专利权）人： | 甘李药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/81;C12N9/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 101102 北京市通州区中关村*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种在毕赤酵母中制备重组羧肽酶B(CPB)的方法。该方法表达量很高，并且表达产物CPB酶原无需经过变性和复性，在直接酶切去除前肽后即可得到有活性的CPB，并且后续的纯化步骤也简单方便。制备的重组羧肽酶B可用于重组人胰岛素工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 羧肽酶 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种羧肽酶B(CPB)的制备方法，包括以下步骤：(1).提供一段核苷酸序列，所述核苷酸序列由编码CPB酶原的基因序列和编码组氨酸标签(His tag)的密码子组成，并且所述编码组氨酸标签的密码子在所述编码CPB酶原的基因序列的3’末端；(2).将上述核苷酸序列克隆到酵母表达载体中；(3).将上述载体转化至酵母宿主；(4).诱导上述酵母宿主表达C端带有组氨酸标签的CPB酶原；(5).酶切上述CPB酶原，生成C端带有组氨酸标签的CPB；(6).纯化上述CPB。
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