[发明专利]快速测定水中UO22+的纳米金催化-硝酸银还原光度法

摘要

本发明公开了一种测定水中UO22+的纳米金催化-硝酸银还原光度法，主要是利用在pH5.5的2-(N-吗啉)-乙磺酸缓冲液中，UO22+可切割双链DNA中的底物链，释放的单链DNA吸附在纳米金表面阻止纳米金的聚集。以反应液中的纳米金催化硝酸银-没食子酸反应，其产物银微粒在460nm处有一较强的吸收峰。随着UO22+浓度增大，反应液中未聚集的纳米金含量增大，460nm处的吸收峰强度线性增大，据此建立测定水中UO22+的催化光度法。本测定方法与已有的方法相比，本测定方法的仪器简单，操作简便，快速，灵敏度高、选择性好。

主权项

一种测定水中UO22+的纳米金催化 硝酸银还原光度法，包括如下步骤：（1）制备双链DNA：取序列为5’ ACTCACTATAGGAAGAGATGGACGTG 3’ 的底物链的单链DNA，以及 序列为5’ CACGTCCATCTCTGCAGTCGGGTAGTTAAACCGACCTTCAGACATAGTGAGT 3’的酶链的单链DNA，用二次蒸馏水溶解至相同的浓度均为170 nmol/L，分别移取此两种单链DNA溶液各0.5 mL，置于10 mL刻度试管中，依次加入1.0 mL 2.0 mol/L 氯化钠溶液，2.8 mL 0.025 mol/L pH 5.5的2 (N 吗啉) 乙磺酸缓冲液，用二次蒸馏水稀释到8.0 mL，混匀后，于800C水浴中加热反应15 min，取出，冷却至室温，获得浓度为21.25 nmol/L以单链DNA计算的双链DNA；（2）制备裂解反应液：在5支5 mL的具塞刻度试管中，依次加入60～80 μL 21.25 nmol/L 双链DNA溶液，再加入100～800 μL 浓度为1.000×10 7 mol/L的UO22+标准溶液，混匀静置7分钟后即刻加入10～35 μL 0.05 mol/L 的三羟甲基氨基甲烷溶液，再次混匀后依次加入100～400 μL 58.0 μg/mL纳米金溶液，最后用二次蒸馏水稀释至1.5 mL，备用；（3）制备UO22+标准体系：取5支5 mL的刻度试管，依次移取50～400 μL 0.02 mol/L pH 3.5～5.8的醋酸 醋酸钠缓冲液，10～20 μL 2.0×10 2 mol/L 硝酸银溶液，3～12 μL 2.8×10 2 mol/L的没食子酸溶液，10～40 μL按步骤（1）制备的裂解反应液，用二次蒸馏水稀释至2.0 mL，于60～90℃水浴中反应10～40 min，用自来水快速冷却至室温；（4）制备空白对照体系：用步骤（2）、（3）的方法不加UO22+标准液制备空白对照体系；（5）分别取按步骤（2～3）制备的UO22+标准溶液及步骤（2～4）制备的空白对照体系溶液适量，置于比色皿中，于紫外可见分光光度计上，扫描各溶液获得其吸收光谱，测定460 nm波长处的吸收光强度A460nm，并测定其空白值(A460nm)0，计算 ΔA460 nm＝A460nm (A460 nm)0；（6）以ΔA460 nm对UO22+的浓度关系做工作曲线；（7）被测物样品测定：取含有UO22+的被测物水样，如有杂质用滤纸滤过；然后移取一定量替换UO22+标准溶液，按步骤（2）～（5）操作，算出被测物的ΔA460 nm样＝A460nm样 (A460 nm样)0 ；（8）根据样品测得的ΔA460 nm样，查步骤（6）的工作曲线，计算出被测物水样中UO22+的浓度。