[发明专利]TaqMan-COLD-PCR方法检测外周血中JAK2V617F突变率无效
| 申请号： | 201110221646.9 | 申请日： | 2011-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN102321741A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 梁国威 | 申请（专利权）人： | 航天中心医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100049 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | TaqMan-COLD-PCR方法检测外周血中JAK2V617F突变率以外周血基因组DNA作为检测标本，在一个反应体系内完成检测，对JAK2V617F突变百分率进行定量检测，检测下限为0.1％，具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、报告时间短等特点，尤其适用于少量突变克隆株的检测。本发明解决的技术问题是，克服背景技术的不足，提供一种高敏感性的外周血基因组DNA中检测JAK2V617F的突变率的方法。由于JAK2V617F突变作为骨髓增殖性疾病唯一分子诊断标志物，已纳入骨髓增殖性疾病诊断标准中，该发明将明显提高上述疾病的诊断率。同时也可用于上述疾病治疗过程中疗效监测。 | ||
| 搜索关键词： | taqman cold pcr 方法 检测 外周血中 jak2v617f 突变 | ||
【主权项】：
本发明是一种高敏感性的在外周血基因组DNA中检测JAK2V617F突变率的方法，以TaqMan/MGB探针技术结合荧光定量cold‑PCR技术的双探针单反应体系的新检测方法，包括：JAK2V617F野生型、突变型质粒标准品的构建、校准，PCR测定体系中引物和探针的设计，PCR扩增变性温度的选择，突变率标准曲线的建立，其特征在于：可对JAK2V617F突变百分率进行定量检测，突变率检测下限0.1％，标本易留取，具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、检测报告时间短等特点。
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