[发明专利]一种硫糖肽的纯化工艺

摘要

本发明涉及化学药物硫糖肽技术领域一种硫糖肽的纯化工艺。包括将硫糖肽粗品溶解于氯化钠溶液中；配制pH为6.0浓度为1wt%、4wt%和10wt%的氯化钠缓冲溶液；离子层析柱预处理；样品上柱：上完样品用1wt%的氯化钠缓冲液冲洗；洗涤：用4wt%的氯化钠缓冲液洗涤离子交换柱；洗脱：用10wt%氯化钠缓冲液洗脱离子交换柱得洗脱液；超滤脱盐：将洗脱液过滤，超滤脱盐；沉淀干燥：用乙醇将浓缩液沉淀，所得沉淀脱水干燥，得到纯化的硫糖肽。经过纯化的硫糖肽，纯度能达到99.5%以上，硫含量15.3%以上，弥补了硫糖肽纯度不高，硫含量偏低的缺陷，可以作为标准品使用，节约了购买标准品的成本。

主权项

一种硫糖肽的纯化工艺，其特征是包括以下步骤：（1）样品准备：将硫糖肽粗品溶解于1wt%的氯化钠溶液中，硫糖肽浓度为5wt%，用醋酸调节pH值为6.0；（2）缓冲溶液的配制：分别配制浓度为1wt%、4wt%和10wt%的氯化钠缓冲溶液，分别加入醋酸0.05M，调节pH为6.0；（3）离子层析柱预处理：离子交换柱中填充琼脂糖凝胶6B，填充体积与被分离样品的体积比为1：2，用10wt%的氯化钠缓冲溶液冲洗离子交换柱，用量为3倍树脂体积，然后用1wt%的氯化钠缓冲溶液平衡离子交换柱，用量为3倍树脂体积；（4）样品上柱：流速控制2倍树脂体积/h，上完样品后，用1wt%的氯化钠缓冲溶液冲洗，用量为1倍树脂体积；（5）洗涤：用4wt%的氯化钠缓冲溶液洗涤离子交换柱1小时，流速为2倍树脂体积/h；（6）洗脱：用10wt%氯化钠缓冲溶液洗脱离子交换柱1小时，流速为2倍树脂体积/h，得洗脱液；（7）超滤脱盐：将洗脱液用孔径0.45μm滤膜过滤，然后用3万分子量的超滤膜进行超滤脱盐至盐度2%，再浓缩至洗脱液体积的3/4；（8）沉淀、干燥：用95%以上的乙醇按体积比1:1将浓缩液在搅拌条件下沉淀，所得沉淀脱水干燥，得到纯化的硫糖肽。