[发明专利]一种新组织血管生成方法

摘要

一种新组织血管生成方法，通过在无菌条件下取小鼠或大鼠胸主动脉、心、肝、脾、肺、肾和结肠组织结合培养板生成主动脉、心、肝、脾、肺、肾和结肠组织各自对应的新组织血管，克服了定量繁琐和成活率不高的缺点，建立了一种简单、方便而又能够被广泛应用的新组织血管生成的模型，该方法还能应用于肿瘤血管生成抑制剂的筛选研究。

主权项

一种新组织血管生成方法，其特征在于：无菌条件下取小鼠或大鼠胸主动脉、心、肝、脾、肺、肾和结肠组织，随即放入预冷的PBS液中清洗，胸主动脉的处理方法为用眼科手术剪及镊子去除动脉管外的纤维和脂肪组织，用PBS液清洗后，在放大镜下，于预冷的DMEM培养基中切取成长度为0.3mm的动脉环或者剪成长度为0.3mm的动脉块，而心、肝、脾、肺、肾和结肠组织的处理方法为用眼科手术剪及镊子去除组织周边的粘连组织后剪成1mm3大小的组织块，取纤维蛋白原溶液平铺于培养板中，培养板的每孔容量为200μL，培养板的每孔中加凝血酶1μL，摇匀后形成凝胶，将切取的组织块植于培养板的凝胶上，再往培养板的每孔中加纤维蛋白原溶剂200μL和凝血酶1μL，摇匀后形成凝胶，这样就形成了三明治式的夹层结构，于该夹层结构上加含质量浓度3‑10％胎牛血清的DMEM培养基1mL，放入体积浓度为5％的CO2和温度为37℃的培养箱中培养，以此就能生成主动脉、心、肝、脾、肺、肾和结肠组织各自对应的新组织血管。