[发明专利]一种用高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的方法

摘要

本发明是针对自然酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，而且酶的制取一般较困难，且成本高昂，难以反复或连续使用等问题，而提出的用高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的方法，包括高碘酸钠的氧化活化和磷脂酶A1的固定化步骤。本发明中，高碘酸钠具有将表面具有大量羟基的滤纸表面羟基氧化成醛基的作用，根据醛基含量越高，与酶的交联率越大的特性固定化磷脂酶A1，提高了酶在反应体系中的活性和稳定性，调节和控制酶的活性与选择性，从而有利于酶的回收，最终得到的固定化酶活为4.8U/cm2，所得到的固定化酶的活力较常规固定化方法有所提高。

主权项

一种用高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的方法，其特征在于：取一张含有羟基的膜悬浮于0.01～0.3mol/L的高碘酸钠溶液中，室温下置于摇床中活化30～100min，取出立即用去离子水洗至中性，吸干水分；然后将含有羟基的膜置于平皿中，在5～35℃条件下，分别与0.01～0.09g/mL的酶液和pH为5.8的磷酸盐缓冲液，加入体积浓度0.05～0.6％戊二醛进行交联反应1～6h，交联反应结束后将所述含有羟基的膜悬浮于体积浓度为1％的氢硼化钠溶液中，4℃反应20～40min，然后用HAI溶液、Kcl溶液和水分别洗涤三次，晾干剪碎即得固定化磷脂酶A1。