[发明专利]大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒有如下组分：无菌双蒸水、10×Taq反应缓冲液、2.5mmol/L??dNTPs、荧光定量反应液，其特征在于：荧光定量反应液含有引物和荧光探针，引物为正向引物和反向引物，正向引物为，反向引物为，荧光探针序列为，荧光探针5′端标记FAM，3′端标记ROX，5U/μL??Taq??DNA聚合酶，标准阳性模板pMCP是含有大鲵虹彩病毒MCP基因1392个核苷酸片段构成的pMD19-T载体，该载体在大肠杆菌E.coli??DH5a中增殖。试剂盒在大鲵虹彩病毒病原检测中的应用。该试剂盒定量准确，检测速度快，仅1小时，加上DNA提取的制备，共仅需2-3小时；方法易行，操作简便；可同时进行高通量的样品检测，准确率高达98％。

主权项

一种大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒由无菌双蒸水、10×Taq反应缓冲液、2.5mmol/L dNTPs、荧光定量反应液组成，其特征在于：荧光定量反应液含有引物和荧光探针，引物为正向引物和反向引物，正向引物为5′ GCGGTTCTCACACGCAGTC 3′，反向引物为5′ ACGGGAGTGACGCAGGTGT 3′，荧光探针序列为5′ AGCCGACGGAAGGGTGTGTGAC 3′，荧光探针5′端标记FAM，3′端标记ROX，5U/μL Taq DNA聚合酶，标准阳性模板pMCP是含有大鲵虹彩病毒MCP基因1392个核苷酸片段构成的pMD19 T载体，该载体在大肠杆菌E.coli DH5a中增殖。