[发明专利]一种莽草酸生产用基因工程菌株的构建方法无效
| 申请号： | 201110248675.4 | 申请日： | 2011-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN102304539A | 公开（公告）日： | 2012-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王春阳;张蕴才;武广君;孟军虎;任存邦;董建辉;石玲珑;李晓霞;乔娟平;叶晓冲;王娜 | 申请（专利权）人： | 河南孟成生物药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 时立新 |
| 地址： | 472500 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种莽草酸生产用基因工程菌株的构建方法，其包括以下步骤：①构建aroA基因敲除的大肠杆菌菌株；②构建含有莽草酸代谢途径中的关键酶基因aroGFBR、aroE、aroB、aroD、tktA和ppsA的重组表达质粒pAR63，且这些基因均处于色氨酸启动子Ptrp的转录控制下；③将重组表达质粒pAR63转入已敲除aroA基因的大肠杆菌菌株，获得表达莽草酸的生产菌株。本发明方法通过敲除aroA单基因实现中断莽草酸代谢的目的，敲除基因少，操作难度小，基因的表达处于自动开关状态，在中后期自动启动，无需诱导物的诱导，减少了向培养基中添加有毒物质的可能性，莽草酸产量高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 莽草 生产 基因工程 菌株 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种莽草酸生产用基因工程菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：①构建aroA基因敲除的大肠杆菌菌株；②构建含有莽草酸代谢途径中的关键酶基因aroGFBR、aroE、aroB、aroD、tktA和ppsA的重组表达质粒pAR63；③将重组表达质粒pAR63转入已敲除aroA基因的大肠杆菌菌株，获得表达莽草酸的生产菌株。
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