[发明专利]微环DNA基因载体组合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种微环DNA基因载体组合物，包括将病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的DNA成分、转基因克隆到载体中，得到的第一微环DNA基因载体，以及将病毒基因组中负责表达病毒组装蛋白质基因克隆到载体中，得到的第二微环DNA基因载体。将这种微环DNA基因载体组合物送入靶细胞内，第一微环DNA基因载体可以表达前基因组RNA，第二微环DNA基因载体可以表达组装蛋白，将前基因组RNA组装形成可以表达所述治疗性转基因产物并具有侵染性的重组病毒。重组病毒可以穿过体内的大部分微血管床屏障，例如肝窦状隙内皮细胞孔，从而可以顺利的感染新的易感细胞，具有较高的投递效率。本发明还提供上述微环DNA基因载体组合物的应用。

主权项

一种微环DNA基因载体组合物，其特征在于，包括：第一微环DNA基因载体和第二微环DNA基因载体；所述第一微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第一微环DNA基因载体包括：第一启动子、病毒基因组中负责基因表达和病毒复制的成分以及用于表达治疗性转基因产物的转基因或转基因表达盒子；所述第二微环DNA基因载体不含标准质粒中能关闭转基因表达的骨架DNA成分，所述第二微环DNA基因载体包括：第二启动子和所述病毒基因组中负责表达所述病毒的组装蛋白的基因；所述第一微环DNA基因载体可以在哺乳动物细胞内稳定的、高通量的表达所述病毒的基因成分和所述治疗性转基因产物至少两个星期，所述第二微环DNA基因载体可以在哺乳动物细胞内稳定的、高通量的表达所述病毒的组装蛋白至少两个星期，所述病毒的基因成分和所述病毒的组装蛋白可以在哺乳动物细胞内组装形成可以表达所述治疗性转基因产物并具有侵染性的重组病毒。