[发明专利]七带石斑鱼精子冷冻保存和应用方法

摘要

一种七带石鱼精子冷冻保存和应用方法，包括：七带石斑鱼精子采集和检测、精子稀释液配制、冷冻保存液配制、精子与冷冻保存液混合、平衡和冷冻保存、解冻和精子活力检测、受精。本发明技术方法冷冻精子活力平均达72.92％，冷冻精子的受精率和孵化率分别为68.08％、76.83％，与新鲜精子无显著差异。本发明利用的稀释液，配方简单、成本低，可大量冷冻保存七带石斑鱼精液，从而解决了七带石斑鱼人工繁殖中精液量不足的问题，提高了七带石斑鱼苗种培育效率。

主权项

一种七带石斑鱼精子冷冻保存方法，包括：七带石斑鱼精子采集和检测、精子稀释液配制、冷冻保存液配制、精子与冷冻保存液混合、平衡和冷冻保存，其特征在于：所述的七带石斑鱼精子采集和检测：精子活力在70 80％；所述的精子稀释液配制：在每升蒸馏水中加入葡萄糖60g、NaCl 10g、NaHCO3 0.5g；所述的冷冻保存液配制：在精子稀释液中加入体积比为10％的二甲基亚砜或10％的1，2 丙二醇；所述的精子与冷冻保存液混合：冷冻保存液与七带石斑鱼精液以1∶1的比例稀释，将稀释精液1ml注入2ml冷冻管中；所述的平衡和冷冻保存：在室温下平衡5min，然后在 60 80℃的液氮蒸气中平衡10min，之后直接将盛放冷冻管的小布袋，投入液氮中冷冻保存。