[发明专利]甘蔗健康种苗的组培快繁方法

摘要

一种甘蔗健康种苗的快速繁殖方法，采用少量洗净的甘蔗成熟种茎，52℃温水脱毒处理30min，38℃催芽，以该腋芽为外植体诱导分化培养获得第一代健康种苗，经PCR检测宿根矮化病，以检测结果阴性的小苗材料，经多代增殖培养，获得大量健康甘蔗种苗，经一次性生根培养、炼苗、移栽沙床假植，抽样进行宿根矮化病PCR检测，证明甘蔗健康种苗合格后，移栽大田或推广种植。本发明可提高甘蔗健康种苗的生产效率，两次PCR检测可保证甘蔗健康种苗的脱毒效果，整个生产过程短，无需经过多级苗圃扩繁，直接将组培苗用于生产或推广应用，具有高效、品质优良、快速等特点，适合甘蔗健康种苗大规模的工厂化生产需要。

主权项

一种甘蔗健康种苗的组培快繁方法，其特征在于步骤如下：（1）取成熟的甘蔗茎，用体积浓度2%的石灰水浸种30min，于52℃恒温水浴锅中浸泡30min，种植于5.5‑6.5cm厚的甘蔗渣基质中，于38℃恒温恒湿培养箱中培养5‑6天，待腋芽出土后即可；（2）取5‑6cm高的腋芽，在无菌条件下灭菌处理后，作为外植体材料；（3）将外植体材料接种于分化培养基中，20天换一次培养基，更换2‑3次培养基即可分化出第一代的甘蔗小苗； （4）利用PCR检测技术对步骤3）中分化出的外植体小苗进行RSD检测；（5）将步骤4）检测合格的全部成苗接入增殖培养基中，进行增殖培养获得分化丛苗，15天接一次培养基，根据需苗量更换培养基3‑5次，增殖至所需的苗量；（6）将步骤5）中的分化丛苗切成单株接在生根培养基中进行生根培养，生根培养基中添加香蕉，培养瓶改成透明的培养袋，培养19‑21天得到袋苗；（7）将步骤6）中的袋苗移出无菌培养室，放置于沙床上炼苗一周；（8）将步骤7）中袋苗洗干净，用0.5%多菌灵浸泡10min，栽种于沙床上，盖薄膜4－6天，夏天加盖荫网，小苗种植至少40天，抽取一定量的样本进行RSD检测，确定小苗的脱毒效果合格后，移栽大田或进行推广应用。