[发明专利]蛋白酶清除口腔色素生物膜的分子生物学模型及其制备方法

摘要

本发明公开了蛋白酶清除口腔色素生物膜的分子生物学模型及其制备方法，本发明在QCM-D或SPR的芯片表面形成自组装的蛋白膜，建立起了口腔蛋白质生物膜的体外模型；随后加入常用食用色素化合物，在QCM和SPR上原位、实时和动态监测色素与生物芯片上的蛋白质的吸附和解吸附反应，建立牙和修复材料表面的着色生物膜模型，研究色素与蛋白质之间相互作用的机制，探索色素导致人然牙和人工材料表面发生着色的机理。进而通过蛋白酶(如木瓜蛋白酶等)，催化降解吸附的蛋白/色素膜，考察不同实验条件下生物蛋白酶降解色素的效率，探索不同实验条件下生物蛋白酶的生物活性，从而可以筛选出安全、有效的生物蛋白酶水解色素生物膜的最佳实验条件。

主权项

一种建立蛋白酶清除口腔色素生物膜的分子生物学模型的方法，包括如下步骤：(1)自组装蛋白质：通过11‑巯基‑11烷酸溶液修饰、1、3‑二甲基氨基丙基‑3‑乙基碳化二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺活化QCM‑D或SPR芯片，再将唾液吸附于QCM‑D或SPR芯片上，乙醇胺盐酸溶液封闭，从而形成自组装的蛋白膜；(2)QCM‑D或SPR监测色素‑唾液生物膜的形成：将待研究的色素吸附于自组装有蛋白膜的QCM‑D或SPR芯片表面，并在QCM‑D或SPR上原位、实时和动态监测色素与生物芯片上的蛋白质的吸附和解吸附反应，建立牙和修复材料表面的着色生物膜模型；(3)蛋白酶水解色素生物膜：通过蛋白酶催化降解吸附于蛋白膜上的各种天然色素。或者将其先于色素作用于QCM‑D或SPR芯片表面，考察其预防色素附着的功能，监测其在不同的浓度、pH、温度、离子强度等条件下催化降解色素生物膜的过程和效率。