[发明专利]小豹斑鹅膏半人工栽培的方法

摘要

本发明涉及一种野生毒菌小豹斑鹅膏半人工栽培的方法，属于大型真菌培养技术领域。其特征是，将实验室大量固体培养的菌丝，直接接种到野外自然生境下，通过添加促生长物质，使其菌丝生长发育，最终长出子实体。本发明利用自然生长条件，直接诱导菌丝体出菇，其操作简单，原生态无污染，节约了能源、厂房等，在目前是一种比较理想的培养方式。鹅膏属是特殊珍贵的大型经济真菌，其价值大应用范围广，在开发新特效药如抗肿瘤、抗菌抗病毒、镇静或麻醉药等领域具有潜在应用前景，但至今因其资源珍稀、难以人工驯化、毒素的化学合成品无活性等问题尚难以开发应用，作为生化试剂的肽类毒素，每克10万美元以上。菌丝在培养条件下难以发育成子实体是制约人工培养的关键因素，本发明以小豹斑鹅膏为例，征对这个问题进行了一定的突破，使鹅膏的人工培养成为可能，为资源的可持续性开发利用等创造了条件。

主权项

一种野生毒菌（小豹斑鹅膏）半人工栽培的方法，其特征为，将实验室大量固体培养的菌丝，直接接种到野外自然生境下，通过添加促生长物质，使其菌丝生长发育，最终长出子实体，主要包括下列步骤：（1）菌丝体的快速繁殖：将已培养出的、长势良好的菌丝体挑出，剔除上面的培养基，切分成4～6份，每份为0.25cm2左右，将其轻轻嵌入500ml三角瓶的扩大培养基表面，培养基为改良SPDM培养基（马铃薯200.00g/L、葡萄糖20.00g/L、MgSO41.00g/L、CaCl2 1.00g /L、KH2PO4 0.50g/L、NH4NO3 0.35g/L、KNO3 0.35g /L、维生素B1 0.10mg/L、琼脂12.00g/L)，补充麦芽汁（15.0～16.5波美）150～180ml，谷氨酸0.10～0.25g/L，生长活性物质10～15mg/L， 调节PH值为5.4～5.6，培养温度为22～24℃，暗培养10～15天，菌丝长满三角瓶；（2）菌丝体栽培种的制作：将以上生长良好的菌丝体，接种到1000ml三角瓶的栽培培养基（50%粉碎的原生境腐叶土+50%麸皮）中，补充麦芽汁（15.0～16.5波美）150～180ml，谷氨酸0.10～0.25g/L，生长活性物质10～15mg/L，调节PH值为5.4～5.6，培养温度为22～24℃，暗培养25～30天，菌丝基本长满三角瓶；（3）菌丝体的野外接种：在6月份雨水较充足、气温较适合的季节，选择武定狮子山阔叶林（小豹斑鹅膏生长的自然生境），轻轻拨开腐叶层，将以上栽培种菌丝埋入阴蔽度较好的树根下，插上标签，记录环境因子；（4）自然条件下菌丝的生长及发育：在接种菌丝的菌塘表面及周围，每5～7天，用浓度为20～30mg/L的生长活性物质喷施一次，在平均土壤含水量为50±5%，空气温度为19±1℃，空气湿度为86±12%，光照为785±785Lux的条件下，80‑95天有子实体长出。