[发明专利]蓖麻杂交种CSR24.181种子纯度的检测方法

摘要

蓖麻杂交种“CSR24.181”种子纯度的检测方法，包括以下步骤：（1）提取蓖麻杂交种种子幼苗叶片基因组DNA；（2）以所述的基因组DNA为模板，选用特定SSR引物对进行PCR扩增；（3）对扩增产物进行凝胶电泳；（4）对电泳结果进行分析，只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的“CSR24.181”杂交种，检测得到的纯度结果的平均值即为其品种种子的纯度。本发明的检测方法具有快速直观、便捷易行、遗传稳定、不受环境条件影响等优点，可弥补传统常规纯度检测工作的不足。

主权项

蓖麻杂交种“CSR24.181”种子纯度的检测方法，包括以下步骤：（1）提取蓖麻杂交种种子幼苗叶片基因组DNA；（2）以所述的基因组DNA为模板，选用SSR引物对进行PCR扩增，所述的SSR引物序列选自如下的一种或多种：引物Rco23     F：CATGGATGTAGAGGGTCGAT     R：CAGCCAAGCCAAAGATTTTC引物Rco26F：TTGCTTGTCAAAGGGGAGTT     R：TCATTTTGAGGGAGAAACCA引物Rco29F：GGAGAAAAGAAAGGGAGAAGG     R：GCCAAAAGCACACTTAATTTGA引物RC05F：CATCACCTCTATCCATCCGTTT     R：CCTTCATCATTGAACTCCCTTC引物RC61F：GCACTGAGGGTTAATTCTGGAC     R：GTCGTAGACCACCTTAGCATCC引物RC129F：TACTGCAACTCAATCCACTGCT     R：GATAGTGCCTTTGCCTCTTTTC引物RC242F：ACCCCTGCAAAACCCTAATAAT     R：TTCGGTGTAAAGAATCCGACTT（3）对扩增产物进行凝胶电泳；（4）对电泳结果进行分析，只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的“CSR24.181”杂交种，检测得到的纯度结果的平均值即为其品种种子的纯度；其中：引物Rco23产生条带大小分别为440bp和600bp的母本特异标记Rco23440和Rco23600 ，产生条带大小分别为400bp和580bp的父本特异标记Rco23400和Rco23580；引物Rco26产生条带大小为700bp的母本特异标记Rco26700，产生条带大小为705bp的父本特异标记Rco26705；引物Rco29产生条带大小为560bp的母本特异标记Rco29560，产生条带大小为580bp的父本特异标记Rco29580；引物RC05产生条带大小分别为330bp和570bp的母本特异标记RC05330和RC05570，产生条带大小分别为360bp和600bp的父本特异标记RC05360和RC05600；引物RC61产生条带大小为220bp的母本特异标记RC61220，产生条带大小为210bp的父本特异标记RC61210；引物RC129产生条带大小为695bp的母本特异标记RC129695，产生条带大小为690bp的父本特异标记RC129690；引物RC242产生条带大小为680bp的母本特异标记RC242680，产生条带大小分别为685bp和690bp的父本特异标记RC242685和RC242690。