[发明专利]一种用于扩增CIK的方法及一种CIK细胞制剂有效
申请号: | 201110297100.1 | 申请日: | 2011-09-30 |
公开(公告)号: | CN102352342A | 公开(公告)日: | 2012-02-15 |
发明(设计)人: | 张赞;苏国新 | 申请(专利权)人: | 上海柯莱逊生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;C12N5/0786;A61K35/14;A61P35/00 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙) 44295 | 代理人: | 黄为 |
地址: | 201201 上海市浦东新区张*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明属于免疫细胞体外培养领域,涉及一种用于扩增CIK的方法以及一种CIK细胞制剂,具体采用如下程序:a、应用淋巴细胞分离液分离出PBMC,将培养袋预先用CD3mAb和CD137mAb包被,将分离得到的PBMC用无血清培养基调整浓度之1×106/ml,并加入IFN-γ至终浓度为1000μ/ml,转移至培养袋中培养;b、培养24小时后加入CD3mAb、CD28mAb、CD137mAb,并加入配置的无血清培养基,配置的无血清培养基中添加了IL-1α、IL-2、IL-12及IL-15,连续培养7-21天后,离心收集获得的CIK细胞;c、b步骤的培养过程中,每隔3天对培养袋中的细胞进行计数,并根据细胞浓度补加培养基,每隔6天添加CD3mAb,CD28mAb,CD137mAb至相应浓度;从而提高了CIK细胞增殖细胞倍数和细胞毒活性。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 扩增 cik 方法 细胞 制剂 | ||
【主权项】:
一种用于扩增CIK的方法,其特征在于,按如下程序实施:a、应用淋巴细胞分离液分离出PBMC,将培养袋预先用CD3mAb和CD137mAb包被,将分离得到的PBMC用无血清培养基调整浓度之1×106/ml,并加入IFN‑γ至终浓度为1000u/ml,转移至培养袋中培养;b、培养24小时后加入CD3mAb、CD28mAb、CD137mAb,并加入配置的无血清培养基,配置的无血清培养基中添加了IL‑1α、IL‑2、IL‑12及IL‑15,连续培养7‑21天后,离心收集获得的CIK细胞;c、b步骤的培养过程中,每隔3天对培养袋中的细胞进行计数,并根据细胞浓度补加培养基,每隔6天添加CD3mAb,CD28mAb,CD137mAb至相应浓度。
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