[发明专利]一种用HPLC仪检测地沟油的方法

摘要

本发明涉及地沟油检测技术领域，特别是涉及一种用HPLC仪检测地沟油的方法；包括乙酸铵溶液配置、DBS标准储备溶液的配置、DBS标准系列溶液的配置、样品处理、HPLC仪色谱条件的构建、样品测定和结果判断等步骤，本发明以DBS为鉴别地沟油的特异性指标，利用高效液相色谱仪为主要检测工具，通过反复试验构建出完整的检测条件，本发明能快速、精确地检测鉴别出样品是否是地沟油，检出限为20μg/ml，弥补了现行国家标准缺陷。

主权项

一种用HPLC仪检测地沟油的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤A、标准溶液的配置：(1)、乙酸铵溶液：称取乙酸铵加水溶解，摇匀配制成质量浓度为0.6～0.8mg/ml的乙酸铵溶液；(2)、DBS标准储备溶液：取DBS加乙醇稀释，摇匀配制成质量浓度为0.5～2mg/m l的DBS标准储备溶液；(3)、DBS标准系列溶液：分别取DBS标准储备液加乙醇稀释，制得质量浓度分别为4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml的DBS标准系列溶液；在所构建的色谱条件下，分别精密量取10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以DBS浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；步骤B、样品处理：先取样品10.0ml，加入乙醇10～20ml，80～100℃水浴加热5～10min，涡旋混合3～5min，5000～10000r/min离心5～10min，弃去油层，旋转蒸发至干；再加甲醇‑2％乙酸的水溶液3～5ml复溶，5000～10000r/min离心5～10min，取上清液加入到已活化的固相萃取柱，接着用正己烷3～5ml淋洗，弃去淋洗液，最后用体积比为98∶2的甲醇‑乙酸铵溶液3～5ml洗脱，洗脱液用0.45μm滤膜滤过，收集滤液，得到待测样品；步骤C、HPLC仪色谱条件的构建：色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm×5μm)，流动相：甲醇‑乙酸铵混合溶液，所述甲醇和乙酸铵的体积比为75～85∶15～25，流速：1.0ml/min，检测波长：244nm，柱温：30～40℃；步骤D、样品测定和结果判断：在构建的色谱条件下，精密量取待测样品10μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，计算峰面积，用所述DBS标准系列溶液所得标准曲线计算待测溶液中十二烷基苯磺酸钠含量；如待测样品色谱图中能检出与DBS标准物质色谱图中任一主峰保留时间一致的色谱峰，则表明待测样品中存在十二烷基苯磺酸钠，判断待测样品为地沟油。