[发明专利]一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法无效

专利信息
申请号: 201110306787.0 申请日: 2011-10-11
公开(公告)号: CN102353647A 公开(公告)日: 2012-02-15
发明(设计)人: 赵丽娇;李莉莉;郑大威;钟儒刚 申请(专利权)人: 北京工业大学
主分类号: G01N21/35 分类号: G01N21/35;G01N1/38
代理公司: 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 代理人: 张燕慧
地址: 100124 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法。该方法是利用红外光谱法检测DNA与烷化剂反应后的红外光谱图,并与空白DNA溶液的红外光谱图进行比较,得到峰位和峰强比发生变化的特征基团,从而确定DNA烷化损伤位点及程度。本发明方法具有操作方法简单且样品便于回收、专属性强、灵敏度高、检测速度快以及安全环保等突出特点,可直接对DNA损伤进行快速检测。
搜索关键词: 一种 dna 损伤 红外 光谱 快速 检测 方法
【主权项】:
一种DNA烷化损伤的红外光谱快速检测方法,包括以下步骤:(1)称取小牛胸腺DNA,溶于1~20mmol/L Tris HCl溶液中,配制成浓度为4~10mg/mL的DNA溶液,pH值为7~8,向DNA溶液中加入烷化剂乙醇溶液,烷化剂的摩尔浓度为0.25~15mmol/L,在37℃下反应4~10h;(2)采用液膜法进行红外光谱测定设定扫描范围4000~400cm 1,分辨率2~4cm 1,扫描次数100~500,采用氘化三甘氨硫检测器(DTGS)和KBr分束器,首先将Tris HCl溶液滴于非水溶性窗片上,干燥后作为背景扫描,再将DNA空白溶液滴于非水溶性窗片上,采用差减法扣除背景后扫描即可得到DNA空白溶液的红外光谱图,重复测定三次取平均值;(3)将与烷化剂反应后的DNA样品采用与步骤(2)中DNA空白溶液相同的方法进行测定,得到DNA样品溶液的红外光谱图,将得到的所有红外谱图使用大气补偿将空气中CO2和H2O的吸收峰扣除,最后进行基线校正;(4)将步骤(3)中所得的DNA空白溶液和DNA样品溶液的特征谱峰进行比较,根据峰位和峰强比的变化确定DNA烷化损伤的位点和程度。
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