[发明专利]诸葛菜染色体乙酸地衣红显带方法

摘要

本发明为诸葛菜染色体乙酸地衣红显带方法，解决传统染色体分离显带方法不适于小染色体植物诸葛菜，程序复杂，操作条件不易掌握，显带成功率低的问题。本发明采用乙酸地衣红进行染色，结合染色体制备方法，可使细胞染色体容易分离，染色体经轻压后形态良好，带型显示清晰，利于目标染色体的识别。采用本发明提供的植物染色体显带方法非常简便，操作容易，尤其适合染色体小的植物带型分析，所显带型清晰，成功率高，便于植物的遗传分析。

主权项

诸葛菜染色体乙酸地衣红显带方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取材：将种子用温水浸泡6～12ｈ，然后换入600mg/L的赤霉素溶液中放入4℃冰箱中20—25小时，然后将种子在培养皿中22—23℃发芽，避光. 种子萌动后，再将种子放入4℃冰箱中20—25小时，取出放回22—23℃温室发芽，待根长至1—2cm时，切取根尖分生组织，（2）预处理：将根尖分生组织经0—1℃冰水处理23—24小时；（3）固定：用卡诺氏液I对根尖分生组织在4℃固定23—25小时，卡诺氏液I配方：无水酒精：冰醋酸=3：1，体积比；（4）解离：将根尖分生组织放入预热到60℃的1mol/LHCl解离，解离时间为8分钟，（5）染色，将根尖分生组织放入乙酸地衣红染色液中，地衣红在乙酸溶液中的质量百分浓度为0.1%，20—26℃保持12—24小时；（6）将根尖分生组织用蒸馏水洗后用体积百分浓度为45%的乙酸压片。