[发明专利]通过敲除口蹄疫病毒受体整合素αv亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法有效
| 申请号： | 201110314862.8 | 申请日： | 2011-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN102352379A | 公开（公告）日： | 2012-02-15 |
| 发明（设计）人： | 何洪彬;武建明;王洪梅;刘晓;王晓晶;高运东;仲跻峰 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院奶牛研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/873;A01K67/027 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 杨琪 |
| 地址： | 250100 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通过敲除口蹄疫病毒受体整合素αv亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法，是将线性化的携带有报告基因的突变的整合素αv亚基基因的打靶载体转染牛体细胞，通过同源重组获得替换整合素αv亚基基因的核供体细胞，将核供体细胞核导入牛的去核卵母细胞中得到重构胚，再将重构胚移入代孕牛子宫中，得到的子代即为整合素αv亚基基因被敲除的杂合子转基因牛。杂合子转基因牛经二次打靶和体细胞克隆获得纯合子转基因牛。用本方法获得的转基因牛低表达或不表达口蹄疫病毒受体整合素αv亚基基因，使FMDV感染率明显下降，其具备了抗FMD的能力。该发明打破了传统的通过免疫学手段预防FMD的思维模式，为控制和消灭牛FMD开辟了新的途径。 | ||
| 搜索关键词： | 通过 口蹄疫病毒 受体 整合 基因 获得 口蹄疫 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种通过敲除口蹄疫病毒受体整合素αv亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法，其特征在于：是将碱基序列如序列表中序列1所示的线性化的携带有报告基因的突变的整合素αv亚基基因的打靶载体转染正常牛的牛胎儿成纤维细胞，通过同源重组获得替换整合素αv亚基基因的核供体细胞，将核供体细胞核导入牛的去核卵母细胞中得到重构胚，再将重构胚移入代孕牛子宫中，得到的子代即为整合素αv亚基基因被敲除的杂合子转基因牛。
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