[发明专利]基于颜色的环介导逆转录等温扩增技术检测GII型诺如病毒无效
申请号: | 201110315740.0 | 申请日: | 2011-10-18 |
公开(公告)号: | CN103060470A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 马学军;罗剑鸣;吴希阳;聂凯;罗乐;段招军 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
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地址: | 102206 北京市昌*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明属于生物技术应用领域,涉及各级疾病预防控制机构,腹泻病毒检测网络实验室,哨点医院等用于对以腹泻、呕吐为主要症状的疑似诺如病毒感染病人的粪便、呕吐物等标本的诺如病毒GII型RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因的检测和监测。具体是应用基于HNB颜色的环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP),通过生物信息学专业软件分析诺如病毒GII型RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因的保守序列,设计出六条引物识别靶序列,并完全与靶序列中八个结合区匹配,省略了单独的逆转录和巢式PCR的二次扩增步骤,反应前加入HNB(羟基萘酚蓝)染料,只需一步就可完成在65℃等温环境中扩增1小时,最后用肉眼观察颜色变化和管底的白色沉淀判定检测结果,与传统的RT-PCR方法比较,它具有更特异、灵敏、便捷的优势。 | ||
搜索关键词: | 基于 颜色 环介导 逆转录 等温 扩增 技术 检测 gii 型诺如 病毒 | ||
【主权项】:
一种用于基于HNB颜色的检测病毒性腹泻病原体GII型诺如病毒RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因(RNA‑dependant RNA polymerase and capsid protein gene)的环介导逆转录等温扩增技术(RT‑LAMP),其中包括:用于检测GII型诺如病毒RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因的6条寡核苷酸引物和HNB(羟基萘酚蓝)染料。
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