[发明专利]一种适用于吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法及试剂盒有效
申请号: | 201110324523.8 | 申请日: | 2011-10-22 |
公开(公告)号: | CN102382875A | 公开(公告)日: | 2012-03-21 |
发明(设计)人: | 商纯尔;陈青松 | 申请(专利权)人: | 浙江夸克生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/54 | 分类号: | C12Q1/54;C12Q1/48;C12Q1/32 |
代理公司: | 杭州宇信知识产权代理事务所(普通合伙) 33231 | 代理人: | 张宇娟 |
地址: | 312500 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种适用于吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法,包括:配制pH6.0-9.0的2-玛啡琳乙基磺酸(MES)缓冲液,其中含有一定量的葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸烯醇式丙酮酸盐(PEP)、ATP,加入含葡萄糖(Glu)的血清样本,并于20-50℃反应3-5分钟。在ATP存在下,GK将Glu转化为葡萄糖-6-磷酸(G6P),同时生成二磷酸腺苷(ADP);在NADP+存在下,G6PD进一步把G6P转化为6-磷酸葡萄糖内酯(G6PL);反应中生成的ADP在PEP的存在下经PK作用重新转化为ATP。依据该法构建的葡萄糖清除试剂置2-8℃保存可稳定14个月,可以应用于目前广泛使用的临床生化自动分析仪。 | ||
搜索关键词: | 一种 适用于 吡喃糖 氧化酶 测定 血清 脱水 葡糖 浓度 葡萄糖 清除 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种适用于吡喃糖氧化酶法测定血清1,5‑脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法,其特征在于:配制pH6.0‑9.0的2‑玛啡琳乙基磺酸(MES)缓冲液,其中含有一定量的葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶(G6PD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸烯醇式丙酮酸盐(PEP)和ATP,加入含葡萄糖(Glu)的血清样本,在ATP存在下,GK将Glu转化为葡萄糖‑6‑磷酸(G6P),同时生成二磷酸腺苷(ADP);在NADP+存在下,G6PD进一步把G6P转化为6‑磷酸葡萄糖内酯(G6PL);反应中生成的ADP在PEP的存在下经PK作用重新转化为ATP。
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