[发明专利]一种检测电离辐射剂量的生物学方法

摘要

本发明属于生物检测技术领域，具体为一种检测电离辐射剂量的生物学方法。根据电离辐射可以干扰细胞周期以及松胞素B可以阻滞细胞分裂而不阻滞细胞核分裂的原理，以不同剂量的r-射线对淋巴细胞照射后，加入一定量松胞素B处理，检测不同剂量照射后淋巴细胞的四核率和双核率。实验结果显示，在0—6.4cGy的低剂量范围内，受照淋巴细胞的四核率与受照剂量呈线性剂量-效应关系，相关系数为0.957，表现出辐射兴奋性效应；在0.4—20Gy的高剂量范围内，受照细胞的双核率与受照剂量之间呈指数方程剂量-效应关系，相关系数为0.978，能很好的反映辐射损伤效应。本发明方法检测指标直观、操作简单、快速、经济，检测结果准确。

主权项

一种检测电离辐射剂量的生物学方法，其特征在于具体步骤如下：（1）、取辐射敏感性细胞株，分为低剂量和高剂量照射组，照射剂量小于10cGy的为低剂量照射组，照射剂量大于40cGy为高剂量照射组；（2）、松胞素B处理：照射后，立即向细胞培养液内加入松胞素B，终浓度为2‑6μg/ml，37℃温箱继续培养24‑36h；（3）、低渗处理：细胞离心弃上清后，每管细胞加入5‑10ml 0.075M KCl混匀，室温低渗10‑20min；（4）、固定液固定：采用两步固定法，低渗后加入固定液，按质量比，固定液：低渗液=1：5‑8，滴管混匀后立即离心，弃上清每管加入5‑8ml固定液固定20‑30min；所述固定液为甲醇和冰醋酸混合溶液，按质量比为甲醇：冰醋酸=7‑9：1；（5）、双核和四核细胞的判断：除产生正常的双核细胞外，对于一大一小的两个细胞核，如果小核的大小超过细胞核的1/3，将此类细胞也记为双核细胞；对于四核细胞的判断标准为，所有大于3个核的细胞均记为四核细胞；每个样品，统计细胞数不少于1000；（6）、通过统计细胞四核率，对低剂量辐射进行定量，通过统计细胞双核率，对高剂量辐射进行定量；双核率=双核细胞数/N，四核率=四核细胞数/N，N为统计细胞数，N不少于1000。