[发明专利]一种防治骨质疏松中药护骨胶囊的有效成分的检测方法

摘要

本发明涉及中药成分的检测方法，具体涉及一种防治骨质疏松中药护骨胶囊的有效成分的检测方法，其是利用多波长的高效液相色谱法检测护骨胶囊中的有效成分，具体步骤是：a、配制待检样品溶液；b、配制混合对照品溶液；c、将待检样品溶液和混合对照品溶液分别进行高效液相色谱检测；d、比较待检样品溶液的高效液相色谱图与混合对照品溶液的高效液相色谱图。本发明的检测方法可以同时检测出护骨胶囊中绿原酸、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、阿魏酸、柚皮苷、淫羊藿苷这五种有效成分及其含量；本发明在检测护骨胶囊的有效成分时，不需制备以上五种成分的各标准品的高效液相色谱图，可节省时间和试剂；本发明的方法简便、精密度高、重现性好。

主权项

一种防治骨质疏松中药护骨胶囊的有效成分的检测方法，所述护骨胶囊的中药组方为何首乌、淫羊藿、熟地黄、龟甲、巴戟天、杜仲、续断、骨碎补、当归和山药，其特征在于：所述护骨胶囊的有效成分的检测方法是利用多波长的高效液相色谱法检测护骨胶囊中的各种有效成分，具体的步骤是：a、配制待检样品溶液：取护骨胶囊内容物，用溶剂配制成含药物4mg/ml～20mg/ml的待检样品溶液；b、配制混合对照品溶液：取2,3,5,4’‑四羟基二苯乙烯‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、阿魏酸、淫羊藿苷、绿原酸、柚皮苷混合后用溶剂配制成各成分浓度均为1μg/ml～200μg/ml的对照品溶液；c、然后将待检样品溶液和混合对照品溶液分别按以下方法进行高效液相色谱检测：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，按进样量为1μL～20μL进样，柱温为10℃～40℃，用由F相、G相和H相组成的流动相以0.3ml/min～1.5ml/min的流速进行梯度洗脱，同时采用检测波长为267nm～273nm、280～286nm、317nm～323nm和322nm～328nm的紫外光多波长检测，获得待检样品溶液和混合对照品溶液的高效液相色谱图；d、将待检样品溶液的高效液相色谱图与混合对照品溶液的高效液相色谱图比较，与混合对照品溶液的高效液相色谱图中相应成分的保留时间相同的峰即是与该成分相同物质的特征峰，并根据峰面积按外标法计算含量；其中，所述梯度洗脱步骤为：0分钟，流动相中F相的体积百分比为5%～20%，流动相中G相的体积百分比为90%～60%，流动相中H相的体积百分比为5%～20%；2分钟～7分钟，F相为5%～20%，G相为90%～60%，H相为5%～20%；5分钟～14分钟，F相为7%～30%，G相为86%～40%，H相为7%～30%；10分钟～23分钟，F相为11%～35%，G相为78%～30%，H相为11%～35%；15分钟～35分钟，F相为15%～40%，G相为70%～20%，H相为15%～40%；20分钟～55分钟，F相为20%～45%，G相为60%～10%，H相为20%～45%；其中，以上百分比均为体积百分比；其中，所述混合对照品溶液的高效液相色谱图中各峰依次为绿原酸、2,3,5,4’‑四羟基二苯乙烯‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、阿魏酸、柚皮苷、淫羊藿苷的特征峰。