[发明专利]一种植物内生菌生物转化葡萄干提取物及其制备和在烟草加香中的应用

摘要

本发明属于烟用香料技术领域，特别涉及一种植物内生菌生物转化葡萄干提取物及其制备和在烟草加香中的应用。方法依以下的步骤进行，(1)植物内生菌的分离和纯化；(2)内生菌的培养；(3)葡萄干的提取和精制；(4)用植物内生菌对葡萄干提取物进行生物转化，得到生物转化的葡萄干提取物。本发明的方法工艺过程简单，成本低廉，所得生物转化的葡萄干提取物能直接用于卷烟的加香加料。生物转化的葡萄干提取物香料具有独特的清甜香，添加在卷烟中有降低刺激，甜香感、烘烤香突出。

主权项

一种植物内生菌生物转化葡萄干提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)植物内生菌的培养将100mLPDB培养基装于250mL三角瓶中，用接种环挑植物内生菌菌丝接种于三角瓶中，放置于30‑37℃的恒温培养箱中培养24‑28h使菌种活化，在转速为150r/min下摇瓶培养，得到活化的种子液，所述的植物内生菌为青霉属(Penicillium sp.)EFCI‑24；保藏编号为CCTCC NO：M2011342；(2)葡萄干提取物的制备将挑好、洗净的葡萄干放入圆底烧瓶中，按葡萄干∶体积百分比浓度为65‑75％的酒精＝1∶5.5‑6.5的重量比混合，在75‑85℃加热回流萃取2.5‑3.5h，提取1‑2次，降温至室温；过滤，收集滤液；将滤液在温度45‑55℃，真空度不低于0.95Mpa的条件下浓缩，浓缩至溶剂蒸发一半，得葡萄干提取物，在高压蒸汽灭菌锅中115℃下灭菌15‑20min；(3)生物转化葡萄干提取物将培养好的植物内生菌接种到灭菌后的葡萄干提取物中，接种体积比为种子液∶葡萄干提取物＝1∶50‑100，置于30‑37℃的恒温振荡器，转速为150r/min下培养24‑28h；(4)将培养后的葡萄干提取物使用板框过滤，过滤其中的菌种，得到生物转化的葡萄干提取物。