[发明专利]用于蛋白质二维电泳分离的微流控芯片接口的制备方法无效

专利信息
申请号: 201110343112.3 申请日: 2011-11-03
公开(公告)号: CN102504010A 公开(公告)日: 2012-06-20
发明(设计)人: 宋站雨;王秋泉;张博;陈宏 申请(专利权)人: 厦门大学
主分类号: C07K1/26 分类号: C07K1/26;G01N27/447
代理公司: 厦门南强之路专利事务所 35200 代理人: 马应森
地址: 361005 *** 国省代码: 福建;35
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摘要: 用于蛋白质二维电泳分离的微流控芯片接口的制备方法,涉及微流控芯片。在微流控芯片竖直通道内制作聚丙烯酰胺凝胶并充满缓冲水溶液;将有机相通过微流控芯片水平通道的入口引入并充满水平通道;将溶解有钛酸四异丙酯的有机相引入并充满水平通道;将钛酸四异丙酯的有机溶液排出水平通道,并将水平通道清洗干净;往水平通道内加入溶解有蛋白质和两性电解质的等电聚焦缓冲液,在水平通道两端施加电场进行等电聚焦,蛋白质根据各自不同的等电点在水平通道内实现第一维分离;等电聚焦完成后,在竖直通道两端施加电场进行第二维凝胶电泳分离,TiO2薄膜上的微孔通过电场,蛋白质在电场作用下穿过TiO2上的微孔进入到第二维通道以进行第二维分离。
搜索关键词: 用于 蛋白质 二维电泳 分离 微流控 芯片 接口 制备 方法
【主权项】:
用于蛋白质二维电泳分离的微流控芯片接口的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)在微流控芯片竖直通道内预先制作好聚丙烯酰胺凝胶并充满缓冲水溶液;2)将有机相通过微流控芯片水平通道的入口引入并充满水平通道,在水平通道与竖直通道的连接处形成水相‑有机相的两相界面;3)将溶解有钛酸四异丙酯的有机相引入并充满水平通道,水平通道内的钛酸四异丙酯会在水相‑有机相的界面处发生水解反应并产生TiO2,使水解产生的TiO2形成具有很多微孔的薄膜;4)将钛酸四异丙酯的有机溶液排出水平通道,并将水平通道清洗干净;5)往水平通道内加入溶解有蛋白质和两性电解质的等电聚焦缓冲液,在水平通道两端施加电场进行等电聚焦,两性电解质在电场作用下沿水平通道形成一个pH梯度,蛋白质根据各自不同的等电点在水平通道内实现第一维分离,两维连接处的TiO2薄膜在等电聚焦过程中能够阻止蛋白质扩散进入第二维通道;6)等电聚焦完成后,在竖直通道两端施加电场进行第二维凝胶电泳分离,TiO2薄膜上的微孔能够通过电场,并且蛋白质在电场作用下能够穿过TiO2上的微孔进入到第二维通道以进行第二维分离。
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