[发明专利]一种卵黄抗体的制备方法、用该方法制得的卵黄抗体及其应用

摘要

一种卵黄抗体的制备方法、用该方法制得的卵黄抗体及其应用，其技术方案是：以中蜂囊状幼虫为病毒增殖模型增值病毒，并用增值的病毒制备中蜂囊状幼虫病毒油佐剂灭活疫苗，用制备的灭活疫苗连续三次免疫产蛋鸡，用间接ELESA法测定抗体效价，效价达到28以上收集鸡蛋，用水合法提纯卵黄抗体。用这种卵黄抗体对感染中蜂囊状幼虫病毒的蜂群进行治疗，治愈率96.25%达以上，并且使用方便、特异性强、起效快、不复发、无药物残留。

主权项

本发明涉及的一种卵黄抗体的制备方法，其特征在于：1.1中蜂囊状幼虫病毒油佐剂灭活疫苗的制备将中蜂囊状幼虫病毒用BCA法检测浓度，用PH=7.4~7.8的磷酸盐缓冲液将病毒浓度稀释至0.2~0.3毫克/毫升，按稀释后的囊状幼虫病毒溶液体积的0.3~0.4%加入甲醛灭活24~48小时后，按稀释后的囊状幼虫病毒溶液体积的4~8%的加入吐温‑80，做水相；司本‑80与10号白油按体积比1: 9~1: 19混合，灭菌，做油相；水相与油相体积比为1:3~2:3，先将油相在8000~10000rpm搅拌，再缓慢加入水相，10000~12000rpm搅拌4~6分钟，进行无菌检验后，制得中蜂囊状幼虫病毒油佐剂灭活疫苗，所制疫苗为油包水型；1.2卵黄抗体的制备用制备的中蜂囊状幼虫病毒油佐剂灭活疫苗免疫产蛋鸡，首次免疫肌肉注射0.5~1毫升，之后第14~15天，第28~30天免疫加强1次，剂量加大至首次注射剂量的2~4倍，经三次免疫后，用间接ELESA法测定抗体效价，当效价达到28以上时，收集鸡蛋，储于 4~8℃，以后每隔30~35天免疫一次所述产蛋鸡，以保证有效抗体效价在28以上；对收集到的鸡蛋用水合法提取卵黄抗体IgY。