[发明专利]霍乱弧菌的链置换扩增恒温扩增(SDA)快速检测试剂盒及其检测方法无效
| 申请号： | 201110345120.1 | 申请日： | 2011-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN102382886A | 公开（公告）日： | 2012-03-21 |
| 发明（设计）人： | 尼秀媚;唐学玺;王悠;周斌;李美芹;段方猛;白桦;雷质文;宋涛;乔宁 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266003 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种霍乱弧菌恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、链置换扩增反应液Ⅰ、Bst DNA Polymerase，BsoBI。方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、SDA链置换恒温扩增、核酸检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 霍乱弧菌 置换 扩增 恒温 sda 快速 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种霍乱弧菌的恒温扩增快速检测试剂盒，其特征在于包括：(1)模板预处理反应液：1×NEB buffer 2，1.0μM上游内引物S1、1.0μM下游内引物S2、3％(V/V)二甲基亚砜、和ddH2O；所述1×NEB buffer 2为：5mM NaCl、1mM Tris‑HCl、1mM MgCl2、0.1mM二硫苏糖醇、和ddH2O，pH 7.9；所述引物S1、S2分别如SEQ ID NO：1和2所示；(2)链置换扩增反应液I：3％(V/V)二甲基亚砜，0.1mg/mL牛血清白蛋白，浓度分别为0.2mM的dATP、dGTP和dTTP，1.0mM dCTPαS，1×NEB buffer 2，和ddH2O；(3)Bst DNA聚合酶；(4)限制性内切酶BsoBI。
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