[发明专利]抗口蹄疫病毒RNAi转基因家畜的制备方法无效
申请号: | 201110349774.1 | 申请日: | 2011-11-08 |
公开(公告)号: | CN102559762A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 何洪彬;王洪梅;刘晓;武建明;杨宏军;宋玲玲;高运东;侯明海;武刚;仲跻峰 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院奶牛研究中心 |
主分类号: | C12N15/873 | 分类号: | C12N15/873;C12N15/85;A01K67/027 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250100 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种通过表达抗口蹄疫病毒RNAi获得抗口蹄疫转基因家畜的方法:是将携带shRNA碱基序列及GFP报告基因的抗口蹄疫病毒RNAi重组Lenti-virus载体线性化并转染正常家畜的胎儿成纤维细胞,利用报告基因GFP、通过流式细胞分选仪筛分转基因核供体细胞,将核供体细胞核导入家畜的去核卵母细胞中得到重构胚,再将重构胚移入代孕家畜子宫中,得到的子代即为抗口蹄疫病毒RNAi的杂合子转基因家畜。杂合子转基因公畜和杂合子转基因母畜正常交配或人工授精繁殖即获得纯合子转基因家畜。用本方法获得的转基因家畜可表达抗口蹄疫病毒RNAi,使FMDV感染率明显下降,具备了抗FMD的能力。 | ||
搜索关键词: | 口蹄疫病毒 rnai 转基因 家畜 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种通过表达抗口蹄疫病毒RNAi获得抗口蹄疫转基因家畜的方法,其特征在于:是将携带shRNA碱基序列及GFP报告基因的抗口蹄疫病毒RNAi重组Lenti‑virus载体线性化并转染正常家畜的胎儿成纤维细胞,利用报告基因GFP、通过流式细胞分选仪筛分转基因核供体细胞,将核供体细胞核导入家畜的去核卵母细胞中得到重构胚,再将重构胚移入代孕家畜子宫中,得到的子代即为抗口蹄疫病毒RNAi的杂合子转基因家畜。
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