[发明专利]一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法无效
| 申请号： | 201110350853.4 | 申请日： | 2011-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN102352418A | 公开（公告）日： | 2012-02-15 |
| 发明（设计）人： | 黄韡;张仲凯;丁铭;游堂贵;张磊;付修廷;秦西云;赵声春;卯志勇;陆文林;倪霞 | 申请（专利权）人： | 云南省烟草公司昭通市公司;云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所;云南省烟草农业科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 昆明正原专利代理有限责任公司 53100 | 代理人： | 陈左 |
| 地址： | 657000 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法，其步骤包括通过马铃薯Y病毒烟草分离物特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用马铃薯Y病毒外壳蛋白基因3′末端引物及四条特异反应引物进行一步法反转录环介导等温扩增(Reverse-transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification，RT-LAMP)法扩增，肉眼观察或浊度仪在400nm波长下检测沉淀浊度或电泳条带观察，判断样品中是否带有病毒。该方法将快速、特异和高灵敏度的病毒免疫捕捉与快捷的RT-LAMP法结合，从而快速、简便的检测烟草样品中的马铃薯Y病毒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 马铃薯 病毒 烟草 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种快速检测马铃薯Y病毒烟草分离物的方法，包括以下步骤：1)在PCR管内利用马铃薯Y病毒烟草分离物特异性抗体诱捕病株样品中的马铃薯Y病毒；2)高温变性获得病毒RNA作为模板；3)利用上述RNA模板的马铃薯Y病毒外壳蛋白基因3′末端引物及四条特异反应引物进行一步法反转录环介导等温扩增Reverse‑transcription loop‑mediated isothermal amplification，RT‑LAMP；4)肉眼观察或浊度仪在400nm波长下检测沉淀浊度，判断样品中是否带有病毒，或者通过琼脂糖电泳观察电泳条带，判断样品中是否带有病毒。
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