[发明专利]中华绒螯蟹胚胎超低温冷冻保存方法

摘要

中华绒螯蟹胚胎超低温冷冻保存方法，其特征是取中华绒螯蟹的前无节幼体期胚胎在30％的1，2-丙二醇+20％二甲基甲酰胺为玻璃化液中平衡40min，在-20℃冰瓶中平衡1min，在液氮口平衡1min后投入液氮中，经40min冷冻后，将胚胎快速提至液氮口平衡1min，再快速放入38℃水浴中解冻，经0.25mol/L蔗糖洗脱10min，前无节幼体期胚胎放在盐度15的海水中培养；取中华绒螯蟹的原溞状幼体期胚胎在玻璃化液中平衡40min，在-20℃冰瓶中平衡1min，再在液氮口平衡1min后投入液氮中，经35min冷冻后，将胚胎快速提至液氮口平衡1min后，再快速放入38℃水浴中解冻，经0.25mol/L蔗糖洗脱10min，原溞状幼体期胚胎放在盐度15的海水中培养。

主权项

中华绒螯蟹胚胎超低温冷冻保存方法，其特征是选取中华绒螯蟹前无节幼体期或原溞状幼体期的胚胎，前无节幼体期胚胎在浓度30％的1，2‑丙二醇+20％二甲基甲酰胺为玻璃化液中平衡40min，然后在‑20℃冰瓶中平衡1min，再在液氮口平衡1min后直接投入液氮中，前无节幼体期胚胎经过40min冷冻后，快速提至液氮口平衡1min，再快速放入38℃水浴中解冻，经0.25mol/L蔗糖洗脱10min，将前无节幼体期胚胎放在盐度15的海水中培养；或采用原溞状幼体期胚胎在浓度30％的1，2‑丙二醇+20％二甲基甲酰胺为玻璃化液中平衡40min，然后在‑20℃冰瓶中平衡1min，再在液氮口平衡1min后直接投入液氮中，原溞状幼体期胚胎经过35min冷冻后，快速提至液氮口平衡1min后，再快速放入38℃水浴中解冻，经0.25mol/L蔗糖洗脱10min，再将原溞状幼体期胚胎放在盐度15的海水中培养。