[发明专利]一种基于转基因抗草甘膦杂交棉花的化学杀雄制种方法

摘要

本发明公开了一种基于转基因抗草甘膦杂交棉花的新型化学杀雄制种方法。本方法适合于以转EPSPS-G6基因的转基因抗甘膦除草剂陆地棉种质系为母本，另一陆地棉品种或种质系为父本配制的杂交棉组合。选择隔离条件良好的适合于棉花生长的制种地，将制种的杂交双亲在相邻地块种植（父母本种植比例1:6）。母本植株见蕾后用20mM的草甘膦溶液对母本棉花植株进行第一次化学杀雄，之后每隔15天化学杀雄1次，整个生长期共化学杀雄4次。第一次化学杀雄20天后，母本棉花植株开出的花朵均为不育，表现为雄蕊不散粉、散粉推迟和花粉不正常，镜检花粉粒100%不育时，可开始进行杂交制种。本发明化学杀雄效果稳定，持续时间长，安全可靠。

主权项

一种基于转基因抗草甘膦杂交棉花的化学杀雄制种方法，其特征它的步骤如下：1）转EPSPS‑G6转基因抗草甘膦棉花种质系及其衍生品种为母本配制的陆地棉品种间杂交组合，其中EPSPS‑G6基因是浙江大学从抗草甘膦的假单胞杆菌中克隆的高抗草甘膦基因，转EPSPS‑G6转基因抗草甘膦棉花种质系是浙江大学通过花粉管通道技术获得的转基因抗草甘膦棉花种质，以陆地棉种质系为父本；2）选择有良好隔离条件、地势较高、排泄方便，并适合于棉花生长的地块，父本与母本植株相邻种植，父本与母本植株种植比例为1：6；3）采用20mM的草甘膦溶液作为转EPSPS‑G6转基因抗草甘膦棉花的化学杀雄剂，草甘膦选自“农达”或95%草甘膦原药，市售10%草甘膦水溶液对转基因棉花的生长发育有显著的影响，不能用于化学杀雄，“农达”用水稀释至化学杀雄浓度，95%草甘膦原药先用1M NaOH溶液溶解，再用水稀释至化学杀雄浓度； 4）选择无风或微风天气进行化学杀雄，避免将化学杀雄剂喷到父本上，母本植株见蕾后进行第一次化学杀雄，第一次化学杀雄后每隔15天化学杀雄1次，整个生长期共化学杀雄4次；每次化学杀雄时，将草甘膦溶液均匀地喷到母本的每株棉花，确保母本棉花植株100%花粉败育；5）第一化学杀雄20天后，母本棉花植株100%的花朵和100%的花粉败育，摘除之前开放的花朵和所结的棉铃，田间鉴定母本100%的花朵和100%的花粉败育时即可进行杂交制种；6）杂交制种方法是取父本棉花植株上的花粉对母本花朵直接授粉，不需对母本进行剥花去雄； 7）收取母本植株的棉花，轧出种子即为杂交棉种子。