[发明专利]一种基于电化学DNA生物传感器的Pb2+、Hg2+同时测定方法

摘要

本发明涉及基于汞离子、铅离子诱导DNA构型发生改变的电化学DNA传感器的制备及其应用，属于分析化学和化学传感器技术领域。本发明通过设计含有两部分功能区——能够特异性识别汞、铅两种离子的DNA序列，并将其组装于金电极表面制成电化学DNA生物传感器。本发明所制备的传感器既可应用于实际水体中汞离子和铅离子单一体系的检测，亦可通过引入掩蔽剂实现混合体系中两种离子的单独检测。该DNA传感器制备方法条件温和，简单方便，稳定性好，此外，该传感器具有有高特异性、高灵敏度和高选择性的优点，且操作简单、检测时无需标记。

主权项

一种基于电化学DNA生物传感器的Pb2+、Hg2+同时测定方法，其特征在于包括以下步骤：(A)电极的预处理与活化：将金电极在抛光布上用Al2O3粉末抛光至镜面，依次在乙醇和去离子水中超声，然后在H2SO4溶液中进行活化处理，用去离子水冲洗干净，用氮气吹干，即可得到表面干净的金电极。(B)DNA修饰电极的制备：将活化的金电极浸泡在一定浓度的杂化DNA溶液中，室温下静置4‑5天。巯基修饰的DNA通过Au‑S键作用自组装于金电极表面，得到DNA修饰电极。(C)DNA生物传感器对不同单一金属离子体系的检测：将DNA修饰电极在K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]溶液中进行电化学阻抗测量，测完后用缓冲溶液淋洗，并分别放置在一定浓度的Hg2+、Pb2+、Co2+、Ca2+、Ni2+、Mg2+、Mn2+、Cu2+、Cd2+、Zn2+等溶液中作用，然后再进行电化学阻抗测量，比较作用前后阻抗值的变化。(D)DNA生物传感器对Hg2+和Pb2+共存体系中的单独检测：将DNA修饰电极分别依次放置在Hg2++cysteine及Hg2++cysteine+Pb2+溶液中，Pb2++G‑DNA及Pb2++G‑DNA+Hg2+溶液中作用，并分别对作用后的DNA修饰电极进行电化学阻抗测量，分别比较作用前后阻抗值的变化。