[发明专利]一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法无效
| 申请号： | 201110366091.7 | 申请日： | 2011-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN102392075A | 公开（公告）日： | 2012-03-28 |
| 发明（设计）人： | 于毅;褚栋;段惠生;张安盛;国栋 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人： | 赵龙群 |
| 地址： | 250100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法，步骤如下：(1)提取西花蓟马基因组DNA；(2)以西花蓟马基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；(3)对步骤(2)制得的PCR产物用限制性内切酶EarI酶切，得酶切产物；(4)对步骤(3)制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。本发明所述的限制性内切酶为常用的限制性内切酶，为筛选两种类型西花蓟马提供了简便稳定的酶切标记，同时探索建立了两种类型西花蓟马的鉴别技术，为今后的两种类型西花蓟马的种群动态鉴定、生物学以及入侵机制的研究奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 pcr rflp 技术 鉴别 西花蓟马 品系 方法 | ||
【主权项】：
一种利用PCR‑RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法，其特征在于，步骤如下：(1)提取西花蓟马基因组DNA；(2)以西花蓟马基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；PCR体系中，引物序列如下：正义引物：5’GGATCACCTGATATAGCATTCCC3’；SEQ ID NO.1反义引物：5’ACTGTAAATATATGATGAGCTCA3’；SEQ ID NO.2(3)对步骤(2)制得的PCR产物用限制性内切酶EarI酶切，得酶切产物；(4)对步骤(3)制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，当PCR产物电泳图谱显示被测样品有两条不同长度的条带时，则该被检测样品为L型西花蓟马；当PCR产物电泳图谱显示被测样品有一条条带时，则为G型西花蓟马。
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