[发明专利]一种玉米苗期根腐病生防木霉菌的筛选方法

摘要

本发明涉及生物领域，特别公开了一种玉米苗期根腐病生防木霉菌的筛选方法。该玉米苗期根腐病生防木霉菌的筛选方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）土样采集；（2）土壤溶液的制备；（3）木霉菌的分离纯化；（4）木霉菌的筛选。本发明玉米苗期根腐病生防木霉菌的筛选方法的有益效果是：方法简便易操作，成本较低；筛选出的木霉菌制备得到木霉菌剂贮存期长，能有效贮存1年以上，防病效果佳，出苗率提高约45%，存活率比对照高50%，保苗效果好，感病指数降低60%，对人畜和生态环境无害，无残留，不产生抗药性，原料来源广，生产成本低于化学农药多菌灵等，还可以变废为宝，具有很好的经济效益和社会效益。

主权项

一种玉米苗期根腐病生防木霉菌的筛选方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）土样采集：选取玉米种植田块，每个地块5点取样，每取样点沿玉米根围从不同位置取样3次，取土深度0‑20cm，同一田块5点取样后将其混合均匀装入无菌塑料袋；（2）土壤溶液的制备：将采集到的土样敲碎、风干后过筛，取充分混匀的土样10g于容量瓶中，加无菌水定容至100mL，振动30min，取10mL土壤悬浮液加入90mL无菌水中，依次稀释至10－6倍，充分摇匀后用于分离；（3）木霉菌的分离纯化：将稀释后的土壤悬浮液在振荡器上振荡10‑20s，吸取1mL土壤悬浮液至LB琼脂平板中央，用涂布棒涂匀，并做好浓度标记，涂好的LB琼脂平板静置5min，使土壤悬浮液渗透进LB琼脂平板中，将涂好的LB琼脂平板倒置于28℃恒温箱中培养，每浓度重复3次，待LB琼脂平板上长出菌落后，挑取菌落边缘幼嫩菌丝到PDA平板上反复纯化，从形成的单个分散的菌落上移植菌丝体于PDA斜面上冷冻保存；（4）木霉菌的筛选：将分离的木霉菌株用PDA培养基复筛后即得。