[发明专利]一种从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法无效
| 申请号： | 201110377240.X | 申请日： | 2011-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN103102378A | 公开（公告）日： | 2013-05-15 |
| 发明（设计）人： | 徐春华;孟庆生 | 申请（专利权）人： | 大兴安岭绿源蜂业有限公司 |
| 主分类号： | C07H21/00 | 分类号： | C07H21/00;C07H1/08 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 165000 黑龙江省*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明属于生物化学技术领域，是一种从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法。本发明的具体提取方法是：将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20-60目，加入重量比1∶8-10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到DNA-蛋白，然后加入重量比1∶6-8的1mol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20-30千赫兹超声30-40分钟，使之裂解得到RNA-核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠-蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蜂花粉 提取 核酸 纯化 方法 | ||
【主权项】：
本发明属于生物化学技术领域，其特征是一种采用超细微粉碎、超声萃取、离心分离、离子交换层析及真空冷冻干燥的技术相结合从蜂花粉中提取核酸及纯化的方法，提取率达到40‑50％。具体是：将经过筛选、去杂、干燥后的蜂花粉冷冻进行超细微粉碎，粒度达到20‑60目，加入重量比1∶8‑10的0.14mol/L氯化钠溶液，匀浆，通过差速离心法使细胞器分离，并在20‑30千赫兹超声30‑40分钟，使之裂解得到DNA‑蛋白，然后加入重量比1∶6‑8的1mol/L氯化钠溶液，匀浆，并在20‑30千赫兹超声30‑40分钟，使之裂解得到RNA‑核蛋白，加入适量十二烷基磺酸钠使蛋白质和核酸分开，加入浓醋酸钾，使十二烷基磺酸钠‑蛋白质复合物沉淀，并使多余的十二烷基磺酸钠转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀，反复提取，采用超离心或是离子交换层析的方法得到核酸纯溶液，采用真空冷冻干燥得到核酸纯物质。
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