[发明专利]一种高效表达工程菌重组蛋白的方法及应用有效
| 申请号： | 201110380864.7 | 申请日： | 2011-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN103131724A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 丘小庆 | 申请（专利权）人： | 畿晋庆三联（北京）生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 张涛 |
| 地址： | 100095 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明“一种高效表达工程菌重组蛋白的方法及应用”，属于生物制药工程。该方法包括如下步骤：(1)重组突变质粒转染大肠杆菌pET系统工程菌中得到阳性单克隆菌落，(2)对阳性单克隆菌落进行增菌得到种子菌液，诱导所述种子菌液大量增菌生长，(3)分离含有表达的目的重组蛋白的菌体上清液，提纯菌体上清液中的重组蛋白，其特征在于：所述大肠杆菌pET系统工程菌指E.coli B834(DE3)。本发明还进一步对大量增菌培养基的成分及蛋白质纯化步骤进行了优化，在蛋白质产量和纯度上都得到了明显的提高。使本发明的方法适合于应用在大肠杆菌工程菌表达重组蛋白的规模化生产中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 工程 重组 蛋白 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高效表达工程菌重组蛋白的方法，包括如下步骤：(1)重组突变质粒转染大肠杆菌pET系统工程菌中得到阳性单克隆菌落，(2)对阳性单克隆菌落进行增菌得到种子菌液，诱导所述种子菌液大量增菌生长，(3)分离含有表达的目的重组蛋白的菌体上清液，提纯菌体上清液中的重组蛋白，其特征在于：所述大肠杆菌pET系统工程菌指E.coli B834(DE3)。
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