[发明专利]游离前列腺特异抗原与总前列腺特异抗原一体化酶联免疫检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开一种游离前列腺特异抗原与总前列腺特异抗原检测一体化酶联免疫检测试剂盒及检测方法。本发明主要包括链霉亲和素包被酶标反应板，生物素标记抗总PSA单克隆抗体，生物素标记抗游离PSA单克隆抗体，酶标记抗PSA多克隆抗体，洗涤缓冲液，显色液，终止液，质控血清。本发明不直接将捕获抗体包被在酶标反应板上，克服了试剂盒受到多种因素干扰酶活性的缺陷。而是利用生物素-亲和素系统于包被工艺，制备成链霉亲和素包被的酶标反应板，捕获生物素标记抗体，形成稳定复合物。在同一酶标反应板上完成两种抗原的检测，直接获取f-PSA/t-PSA的比值，不仅提高测定准确性，并且缩短测定时间、简化测定流程、降低测定成本、效率提高。

主权项

一种游离前列腺特异抗原与总前列腺特异抗原的一体化酶联免疫检测方法，其特征在于：生物素标记抗总PSA单克隆抗体和生物素标记抗游离PSA单克隆抗体，分别加入到同一链霉亲和素包被酶标反应板的2个孔中，加入待检血清，37℃温育30分钟，弃掉反应液体，加洗涤缓冲液，静置后弃液、拍干；再加入等量酶标记PSA抗体，37℃温育30分钟，加洗涤缓冲液，去除未结合酶标记抗体、拍干；分别加入显色底物，避光反应15分钟；各孔加入终止液，终止反应，经酶标仪读取吸光度值，通过计算F孔A450/T孔A450获得f‑PSA/t‑PSA比值。