[发明专利]一种重组型核酸建构物及使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法

摘要

一种核酸建构物，可调控且有效破裂菌株，将菌株胞内生产的重组蛋白释放于胞外，以达到方便且快速回收胺基酸组成物的目的。此核酸建构物包括一个控制表现基因的核酸物，以及可被诱导表现的基因产物；其中，一个控制表现基因的核酸物包含了一个热敏感性抑制蛋白(heat-sensitive repressor protein)CI857基因，λPRPL启动子和热休克蛋白(heat shock protein)groEL启动子，及一个lacO控制子位置(operator site)；而可被诱导表现的基因产物包括一个噬菌体φX174溶菌基因E，结合一个噬菌体T4溶酶素基因或一个T7溶酶素基因。以生产Agrobacterium radiobacter NRRL B 11291amidohydrolase(AHL)以及hydantoinase(HDT)为实施例，生产菌株具有此核酸建构物，一经温度诱导作用后，生产菌株生长随即停止，且可有效将诱导生产的重组型AHL以及HDT释放至胞外。

主权项

一种使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法，其特征在于，包含下列步骤：(a)构筑一第一核酸建构物，该第一核酸建构物包括一第一核酸序列及一第二核酸序列，其中该第一核酸序列包含有噬菌体φX174溶菌基因E，该第二核酸序列包含有噬菌体溶酶素基因；(b)构筑一质体含有一第二核酸建构物，其中该第二核酸建构物进一步包括一热敏感性抑制蛋白CI857基因的核酸序列，一λPRPL启动子的核酸序列，一热休克蛋白groEL启动子的核酸序列，及一lacO控制子位置的核酸序列；(c)将该第一核酸建构物植入该质体中，形成一重组型核酸建构物；(d)将步骤(c)所形成的该重组型核酸建构物转形至一个宿主细菌，得到一重组型菌株；(e)将该重组型菌株，培养于培养基中，经一温度诱导作用后，以使该第一核酸建构物表现，使细菌破裂而释出细胞内物质；(f)收获步骤(e)的该重组型菌株释出至培养基中的物质。