[发明专利]一种利用白脊藤壶金星幼虫进行防污能力评价的快速测定方法

摘要

本发明涉及一种利用白脊藤壶金星幼虫进行防污能力评价的快速测定方法。该方法先将白脊藤壶幼虫培养至金星幼虫阶段，然后将白脊藤壶金星幼虫在待测防污材料表面孵育，利用固定液固定防污材料表面的藤壶胶黏剂；然后在材料表面滴加考马斯亮蓝染液；利用脱色液对染色后的防污材料进行脱色，脱色后，将材料在空气中自然风干，置于显微镜下进行观察，材料样品表面可见蓝色部分为白脊藤壶金星幼虫在可逆阶段于防污材料表面分泌产生的胶黏剂，拍照，分析计算胶黏剂的附着数量和附着面积。该方法可有效表征白脊藤壶金星幼虫在各种防污材料表面分泌形成的胶黏剂，具有分辨率高，评价时间短、操作简便、数据可靠等特点，可应用于海洋防污技术领域。

主权项

一种利用白脊藤壶金星幼虫进行防污能力评价的快速测定方法，其特征在于该方法利用超疏水聚四氟杯作为试验容器，对白脊藤壶金星幼虫可逆附着阶段产生的胶黏剂进行显色反应，依据显色结果评价材料的防污性能，按照以下步骤操作：第一步：白脊藤壶金星幼虫的培养：将海边潮间带采集的白脊藤壶成体清洗干净并阴干后放入灭菌海水中，通气培养，2h后即有藤壶幼虫释放，利用幼虫向光性收集幼虫，并转移至新鲜海水中进行喂养，培养温度25℃，培养6‑9天后，白脊藤壶幼虫可发育至金星幼虫阶段。第二步：黑暗条件下，白脊藤壶金星幼虫在防污性能待测材料表面孵育；第三步：白脊藤壶可逆胶黏剂的考马斯亮蓝染色：将待测防污材料取出，蒸馏水冲洗后，首先利用固定液固定待测防污材料表面的藤壶胶黏剂，固定时间20‑60min；然后在材料样品表面滴加考马斯亮蓝染液，直至染液能够全部覆盖待测材料，染色0.5‑1.5h；其中，固定液的配制方法为：350mL蒸馏水中加入57g三氯醋酸，17g磺基水杨酸，150mL甲醇；考马斯亮蓝染液的配制方法为：230mL蒸馏水中加入1.25g考马斯亮蓝R‑250，230mL甲醇，40mL冰醋酸；第四步：利用脱色液对染色后的待测防污材料进行脱色，脱色后，将材料样品在空气中自然风干，脱色液的配制方法为：1000mL蒸馏水中加入100mL冰醋酸，300mL乙醇；第五步：显微镜观察及分析：将风干后的材料样品置于三维视频显微镜下进行观察，材料样品表面可见蓝色部分为白脊藤壶金星幼虫在可逆阶段于防污材料表面分泌产生的胶黏剂，拍照，分析胶黏剂的附着数量和附着面积。