[发明专利]利用无外源培养的空心菜离体根系单异体繁殖根结线虫的方法

摘要

本发明公开了一种利用无外源培养基培养的空心菜离体根系单异体繁殖根结线虫的方法，该方法包括以下步骤：(1)制备空心菜离体根系：将空心菜种子接种到1％水琼脂培养基平板上，待种子萌发的根系长到3-4cm时，切取根尖，将根尖接种到无外源离体根系培养基平板上，15～20d长出大量的离体根；(2)根结线虫的接种和培养：将根结线虫卵囊制备成卵粒悬浮液接种在步骤(1)的空心菜离体根上，培养50～90d即可得到大量单一的根结线虫。本发明方法繁殖率高、操作简单、不易污染、应用范围广、实用性强，解决了难以获得纯化的大量根结线虫的问题，且避免了盆栽实生苗接种繁殖根结线虫方法的费时、占据大量空间、受季节等自然和环境条件限制以及易被其他生物污染等不足。

主权项

一种利用无外源培养基培养的空心菜离体根系单异体繁殖根结线虫的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备空心菜离体根系将空心菜种子消毒、接种到1％水琼脂培养基平板上；将1％水琼脂培养基平板置于温度为25℃、光照/黑暗时间为12h/12h的环境中培养，待种子萌发的根系长到3‑4cm时，切取根尖，将根尖接种到无外源离体根系培养基平板上，将无外源离体根系培养基平板置于温度为25℃的黑暗环境中培养，15～20d长出大量的离体根；(2)根结线虫的接种和培养将根结线虫卵囊1～3个消毒后，制备成卵粒悬浮液接种在步骤(1)的空心菜离体根上，将离体根置于温度为25℃、光照/黑暗时间为12h/12h的环境中培养50～90d即可得到根结线虫；上述的操作均在无菌条件下进行。