[发明专利]同时定量检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素B1的方法无效
申请号: | 201110403176.8 | 申请日: | 2011-12-07 |
公开(公告)号: | CN102520178A | 公开(公告)日: | 2012-06-27 |
发明(设计)人: | 严亚贤;王元凯;孙建和 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种同时定量检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素B1的方法,包括如下步骤:1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA,FB1-KLH和FB1-OVA;2、制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体;3、制备胶体金,标记所述单克隆抗体,将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上;4、在硝酸纤维素膜上进行点样;5、组装成试纸条;6、分别绘制ZEN、FB1浓度与显色值的标准曲线;将待测样品的显色值带入标准曲线中,得到待测样品中ZEN和FB1的含量。本发明的检测准确率高,检测速度快,所需时间短,不需经培训就可使用,满足粮食储存销售机构、出入境、海关等检验部门快速、正确地判断ZEN和FB1含量的要求。 | ||
搜索关键词: | 同时 定量 检测 玉米 赤霉烯酮 毒素 b1 方法 | ||
【主权项】:
一种同时定量检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素B1的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,将ZEN半抗原分别与BSA和OVA偶联,得到偶联物ZEN‑BSA和ZEN‑OVA;将FB1半抗原分别与KLH和OVA偶联,得到FB1‑KLH和FB1‑OVA;步骤二,分别用所述ZEN‑OVA和FB1‑KLH作为免疫原,采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体;步骤三,制备胶体金,用该胶体金分别标记所述抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体;将所述标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上;步骤四,在硝酸纤维素膜上进行ZEN‑BSA、FB1‑OVA、兔抗鼠二抗的点样,之后将该硝酸纤维素膜放入牛血清白蛋白溶液中封闭,干燥;步骤五,将所述金标垫,所述点样后的硝酸纤维素膜,样品垫和吸收垫组装成试纸条;步骤六,将已知的不同浓度的ZEN标准品溶液和FB1标准品溶液滴入试纸条样品槽中,显色,分别绘制ZEN、FB1浓度与显色值的标准曲线;步骤七,将待测样品的甲醇提取液滴入试纸条样品槽中,显色,将显色值分别带入ZEN和FB1标准曲线中,即可得到待测样品中ZEN和FB1的含量。
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