[发明专利]单增李斯特氏菌核酸层析检测试剂盒及其检测方法和应用

摘要

本发明公开了单增李斯特氏菌核酸层析检测试剂盒及其检测方法和应用，属于分子生物学和免疫学领域。本发明是将分子生物学的聚合酶链式反应技术和免疫层析技术进行结合，实现对食品中单增李斯特氏菌的快速检测。本发明试剂盒包括DNA提取、PCR扩增及试纸条检测共三部分。其中通过对引物的修饰，并在制备试纸条中选择相应的包被物和标记物，从而实现分子生物学技术和免疫层析技术的结合，达到对食品中单增李斯特氏菌特异扩增产物的检测，与传统生化方法相比大大节省了检测时间，简化操作步骤，具有准确、迅速、便捷、安全等特点，适宜大量样品的检测。

主权项

一种单增李斯特氏菌核酸层析检测试剂盒，包括细菌裂解液a、阴性对照品c、阳性对照品d和试纸条，所述试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫顺次搭接黏贴在底衬上组成；其特征在于试剂盒还包括PCR反应液b，PCR反应液b中含有上游引物F和下游引物R，上游引物F为5’CCCCAAGTAGCAGGACAT 3′，下游引物R为5′AGATTACACTGGATAATT 3′；所述上游引物F标记生物素，下游引物R标记地高辛；所述结合垫上包被胶体金颗粒标记的鼠抗地高辛抗体，硝酸纤维素膜上有包被亲和素的检测线和包被羊抗鼠抗体的控制线。